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ELISA試劑盒操作細(xì)節(jié)常見問題整理
閱讀:1962發(fā)布時間:2022-1-6
1)問:是不是空白對照就是什么都不加,?
答:不加樣本,,不加樣本稀釋液,不加酶標(biāo)試劑,,其他都可以加,。
2)問:樣本稀釋液是配好的嗎?
答:樣本稀釋液是配好的,。
3)問:樣本稀釋液可以用來直接稀釋血清嗎,?
答:可以的,直接加40ul就可以了,。
4)問:洗滌液是濃縮的,;是一次配好,還是現(xiàn)配現(xiàn)用,?謝謝,。
答:濃縮的,現(xiàn)配現(xiàn)用,。
5)問:加入的顯色液A\B分別是什么物質(zhì),?作用原理?
答:顯色劑A和B,,是經(jīng)典的TMB顯色系統(tǒng),。具體原理可以參考免疫方面的教科書。在這里不詳細(xì)列出,。
6)問:終止液是什么物質(zhì),?如何做到終止反應(yīng)的?
答:終止液是2mol的硫酸溶劑,。終止反應(yīng)也是和原理相關(guān),。這個參考教科書!
7)問:稀釋液是什么成分,?
答:標(biāo)準(zhǔn)稀釋液是PBS(PH=7.2-7.4,,濃度是0.01mol/L)。樣本稀釋液是含有0.5%BSA的PBS(PH=7.2-7.4,,濃度是0.01mol/L),。
8)問:需要避光保存的試劑是哪個?
答:需要避光的是顯色液B,。
9)問:試劑盒從冰箱取出后,,室溫放置會影響其效果嗎,?
答:試劑盒在做實(shí)驗前應(yīng)該要室溫平衡一小時。短時間(3,、4小時)沒有任何影響,。
10)問:樣品研磨后是立即離心,還是在4度冰箱里提取幾個小時以后再離心,?
答:樣本研磨后立即離心即可,。
補(bǔ)充:5%BSA封閉液(BlockingBuffer)適用于WesternBlotting、ELISA以及免疫組化實(shí)驗中非特異性蛋白結(jié)合位點(diǎn)的封閉,。
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