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迷你離心機提供多種功能和*更換轉(zhuǎn)子的設(shè)計
閱讀:1724發(fā)布時間:2021-12-6
迷你離心機提供多種功能和*更換轉(zhuǎn)子的設(shè)計,性能可靠,操作簡單方便,,僅需放好微量管,,蓋上蓋子即啟動,轉(zhuǎn)速可以很快達(dá)到zui高轉(zhuǎn)速,,其離心力均勻快速的施加到微量管的管帽和管壁上,,特別適用于處理PCR管和微量過濾,快速從試管壁或試管蓋上甩下試劑,,以及試管或排管的慢速離心,。
想要通關(guān)蛋白表達(dá)少不了離心機。常言道細(xì)節(jié)決定成敗,尤其像蛋白表達(dá)提純這樣復(fù)雜的實驗,。一個操作上的小失誤,,可能直接影響結(jié)果。
雖然可以大致分為三步,,表達(dá),、分離、純化,,但是這個過程十分繁瑣,。
蛋白表達(dá)前期還有一系列復(fù)雜過程,耗費時間也長,,到后面一步,,還不能放松警惕。
蛋白進(jìn)行純化是通關(guān)的一步,,選擇合適的純化方法,,可以提高蛋白的純化效率,讓蛋白純化簡單便捷,。常用的方法有:親和層析,、離子交換層析、凝膠過濾層析,、疏水層析等,。
親和層析
親和層析純化是利用生物大分子物質(zhì)具有與某些相應(yīng)的分子專一性可逆結(jié)合的特性進(jìn)行蛋白純化的技術(shù)。
離子交換層析
離子交換層析是一種依據(jù)蛋白表面所帶電荷量不同進(jìn)行蛋白分離純化的技術(shù),。
凝膠過濾層析
凝膠過濾(也叫排阻層析或分子篩)是一種根據(jù)分子大小從混合物中分離蛋白質(zhì)的方法,。
疏水作用層析
疏水作用層析是利用鹽-水體系中樣品分子的疏水基團(tuán)和層析介質(zhì)的疏水配基之間疏水力的不同而進(jìn)行分離的一種層析方法。
雖然方法多種多樣,,但是,,都需要用離心機來進(jìn)行分離純化。
用脂肪氧合酶重組蛋白的誘導(dǎo)為例:
1.接種含有重組脂肪氧合酶蛋白的大腸桿菌BL21菌株于5mLLB液體培養(yǎng)基中(含100ug/mL氨芐青霉素),,37℃震蕩培養(yǎng)過夜,。
2.按1∶50或1:100的比例稀釋過夜菌,一般轉(zhuǎn)接1mL過夜培養(yǎng)物于100mL(含100ug/mL氨芐青霉素)LB液體培養(yǎng)基中,,37℃震蕩培養(yǎng)至OD600=0.6-0.8(*0.6,,大約需3h)。取10ul樣品用于SDS-PAGE分析,。
3.對照組不加誘導(dǎo)劑,,實驗組加入IPTG至終濃度0.5mmol/l,37℃繼續(xù)培養(yǎng)1-3h,。
4.離心機12000rpm離心10min,,棄上清,,菌體沉淀保存于-20℃或-70℃冰箱中。
以上就是關(guān)于蛋白表達(dá)的通關(guān)講解,,本文重點就是要表達(dá),,一個實驗的成敗,細(xì)節(jié)很關(guān)鍵,,雖然人工方面是可以人為把控的,,但是輔助設(shè)備的細(xì)節(jié),還是要多加注意,,選一臺合適的離心機很關(guān)鍵,。
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