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基因轉(zhuǎn)染就用它，價(jià)格實(shí)惠又好用,，還可以免費(fèi)試用,？
閱讀：1087發(fā)布時間：2020-9-30
陽離子聚合物--聚乙烯亞胺（polyethyleminine，PEI)
聚乙烯亞胺是目前研究的陽離子聚合物非病毒基因載體,，它是由單體(-CH,CH,-NH-)構(gòu)成的具有伯胺﹑仲胺和叔胺基團(tuán)的水溶性聚合物,。PEI單體中每3個原子含1個氮，并構(gòu)成同的胺基,。這些胺基的pKa值不同,，使 PEI在較寬的pH范圍均可以被質(zhì)子化,這是PEI有較強(qiáng)的結(jié)合DNA附細(xì)胞并作為基因轉(zhuǎn)導(dǎo)載體的重要原因。
分子量是決定其轉(zhuǎn)染效率重要因素，高分子量的PEI具有高效的基因轉(zhuǎn)染效率,，但因?yàn)槠浯罅空姾傻拇嬖谝约胺巧锝到庑?，可以?dǎo)致細(xì)胞膜去穩(wěn)定化，顯示出較大的細(xì)胞毒性,，低分子量的PEI(低于2kDa)毒性低,，但基因轉(zhuǎn)染效率也隨之降低。在HeLa,、COS7,、293T和CHO四種細(xì)胞上評價(jià)交聯(lián)PEI作為基因載體體外轉(zhuǎn)染pGL3的效率。發(fā)現(xiàn)二硫鍵含量和PEI分子量大小決定了轉(zhuǎn)染效率,。
不同分子量的PEI轉(zhuǎn)染效率不同
枝狀的 800 kD PEI 是*報(bào)道的可用于多種細(xì)胞轉(zhuǎn)染的試劑,，枝狀的 25 kD PEI（25B）用HEK293 細(xì)胞大規(guī)模瞬時轉(zhuǎn)染，其轉(zhuǎn)染效率較枝狀2 kD,、600 kD,、800 kD 或線狀 22 kDPEI（22L）的高。
有研究報(bào)道,，比較了 3 種商品化的 PEI 轉(zhuǎn)染試劑 25 kD LPEI,、40 kDPEI-Max、PEI pro,，轉(zhuǎn)染 HEK293 和 CHO 細(xì)胞,，PEI pro 的轉(zhuǎn)染效率低于 25 kD LPEI、40 kD PEI-Max,，PEI pro 的毒性,。經(jīng)過優(yōu)化，PEI-Max 的表達(dá)量優(yōu)于 25 kD LPEI,。
PEI 介導(dǎo)的瞬時轉(zhuǎn)染中 DNA 和 PEI 比例一般為1:2 ~ 1:3（W/W）,，提高轉(zhuǎn)染試劑比例會提高轉(zhuǎn)染效率，但是隨之細(xì)胞毒性也會增加,。另外轉(zhuǎn)染時的細(xì)胞密度,、DNA-PEI聚合物的大小、培養(yǎng)基的組成等都會影響轉(zhuǎn)染效果,。
陽離子聚合物--脂質(zhì)體
陽離子脂質(zhì)體易穿透細(xì)胞膜,，轉(zhuǎn)染效率要明顯高于其他轉(zhuǎn)染試劑，因而也廣泛用于瞬時轉(zhuǎn)染,，但因其化學(xué)合成不易,，商業(yè)化常用的脂質(zhì)體如 Lipofectamine 價(jià)格較高，遠(yuǎn)貴于其他化學(xué)轉(zhuǎn)染試劑,，因此只適合于小量瞬時轉(zhuǎn)染,。
目前的脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染體系是將陽離子脂質(zhì)體與 DNA 溶液混合,，以形成 DNA 夾在脂質(zhì)雙分子層之間的結(jié)構(gòu)。HEK293 細(xì)胞是非常適合進(jìn)行瞬時轉(zhuǎn)染的細(xì)胞,，很容易接收外來 DNA,，在合適的轉(zhuǎn)染條件下，脂質(zhì)體轉(zhuǎn)染效率可達(dá) 80% 以上,， 使用商品化羅氏的 FuGene HD 或者Invitrogen 的 Lipofectamine2000 的轉(zhuǎn)染效率甚至可達(dá)90% 以上,。但是傳統(tǒng)的 CHO 細(xì)胞的轉(zhuǎn)染效率相對較低，只有 40% ~ 60%,。
Thermo Fisher 公司新開發(fā)的Expi293F 和 ExpiCHO 瞬時轉(zhuǎn)染系統(tǒng)的轉(zhuǎn)染效率和表達(dá)量有了較大的提升,，但是商品化的轉(zhuǎn)染試劑盒培養(yǎng)基價(jià)格較貴，不太適用于產(chǎn)業(yè)化放大,。
因此,，目前PEI轉(zhuǎn)染試劑，價(jià)格實(shí)惠深受廣大科研伙伴的熱愛,。重點(diǎn)是超級便宜?。?！便宜到什么程度呢,？偷偷告訴你：據(jù)說一次可配1L的量！1L,？,？天啊，怎么能用的完,？如此便宜實(shí)惠的轉(zhuǎn)染試劑該如何操作呢,？
目前，小編給大家謀福利了,，“免費(fèi)試用PEI轉(zhuǎn)染試劑”活動！,！
| 品牌 | 貨號 | 規(guī)格 |
| SEROCHEM | PRIME-P100-1G | 1g |
| SEROCHEM | PRIME-P100-100MG | 100mg |
| SEROCHEM | Prime-AQ100-100ML | 100ml |
| SEROCHEM | Prime-AQ100-5ML | 5ml |
活動內(nèi)容：客戶可申請PEI轉(zhuǎn)染試劑免費(fèi)試用,，單個研究組僅限申請1 瓶，數(shù)量不多,，先到先得,！
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