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進(jìn)口胎牛血清-如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
閱讀:1056發(fā)布時(shí)間:2019-11-26
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時(shí),,請(qǐng)隨時(shí)將之搖晃均勻,,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生。
(2) 血清分裝凍存時(shí),,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,,因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀。
(4) 勿將血清置于37℃太久,,否則血清會(huì)變得渾濁,,同時(shí)血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會(huì)因此受到破壞,從而影響血清的品質(zhì),。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,,若非必要,可以無須做此步驟,。
(6) 若必須做血清的熱滅活,,請(qǐng)遵守56℃,30分鐘的原則,,并且隨時(shí)搖晃均勻,。溫度過高,時(shí)間過久或搖晃不均勻,,都會(huì)造成沉淀物的增多,。
5,、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,可長(zhǎng)期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時(shí),,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因?yàn)橐恍┛股睾脱逯械幕境煞衷诮鈨龊缶烷_始降解。
細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點(diǎn)是污染嗎?如何處理?
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點(diǎn)生成,,首先,,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,然后,,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長(zhǎng)的狀態(tài),,黑點(diǎn)是否游動(dòng)。如果細(xì)胞被污染,,微生物則會(huì)大量繁殖,,培養(yǎng)基就會(huì)迅速變黃、變混濁,。污染包括細(xì)菌污染,、支原體污染等。
如果在鏡下觀察細(xì)胞,,生長(zhǎng)狀態(tài)良好,,與黑點(diǎn)出現(xiàn)前相比,沒有任何變化,,那么,,黑點(diǎn)的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細(xì)胞生長(zhǎng)過老,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,,不宜細(xì)胞生長(zhǎng);
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì)、容器不合格,??蓱?yīng)用離心、過濾的方法去除這些黑點(diǎn);
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點(diǎn),,可能是原代組織中的雜質(zhì),,多次傳代可以消除。
細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點(diǎn)生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。
(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴,。
(3) 培養(yǎng)基保持jiaPH值7.0- 7.2。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),,容器定期刷洗,。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的jia時(shí)機(jī),細(xì)胞切勿生長(zhǎng)過老。
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