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進(jìn)口胎牛血清-如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
閱讀:1135發(fā)布時間:2019-11-26
如何避免血清中產(chǎn)生沉淀?
按如下操作可避免沉淀的產(chǎn)生:
(1)解凍血清時,,請隨時將之搖晃均勻,使溫度及成分均一,,減少沉淀的發(fā)生,。
(2) 血清分裝凍存時,須規(guī)則搖晃均勻(小心勿造成氣泡),,使溫度與成分均一,。
(3) 勿直接由-20℃直接至37℃解凍,因溫度改變太大,,容易造成蛋白質(zhì)凝結(jié)而發(fā)生沉淀,。
(4) 勿將血清置于37℃太久,,否則血清會變得渾濁,同時血清中許多較不穩(wěn)定的成份也會因此受到破壞,,從而影響血清的品質(zhì),。
(5) 血清的熱滅活非常容易造成沉淀物的增多,若非必要,,可以無須做此步驟,。
(6) 若必須做血清的熱滅活,請遵守56℃,,30分鐘的原則,,并且隨時搖晃均勻。溫度過高,,時間過久或搖晃不均勻,,都會造成沉淀物的增多。
5,、 培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素后,,可長期保存嗎?
一旦您在新鮮培養(yǎng)基中添加了血清和抗生素時,您應(yīng)該在兩到三周內(nèi)使用它,。因為一些抗生素和血清中的基本成分在解凍后就開始降解,。
細(xì)胞培養(yǎng)中出現(xiàn)黑點是污染嗎?如何處理?
一旦您在細(xì)胞培養(yǎng)的過程中發(fā)現(xiàn)有黑點生成,首先,,要肉眼觀察培養(yǎng)基是否混濁,,然后,在鏡下觀察培養(yǎng)細(xì)胞生長的狀態(tài),,黑點是否游動,。如果細(xì)胞被污染,微生物則會大量繁殖,,培養(yǎng)基就會迅速變黃,、變混濁。污染包括細(xì)菌污染,、支原體污染等,。
如果在鏡下觀察細(xì)胞,生長狀態(tài)良好,,與黑點出現(xiàn)前相比,,沒有任何變化,那么,,黑點的出現(xiàn)可能與以下幾種情況有關(guān):
(1)細(xì)胞生長過老,,破碎的細(xì)胞殘骸;
(2)血清質(zhì)量不好,反復(fù)凍融的結(jié)果;
(3)配制培養(yǎng)基的pH值偏高,,不宜細(xì)胞生長;
(4)配制培養(yǎng)基的水質(zhì),、容器不合格,。可應(yīng)用離心,、過濾的方法去除這些黑點;
(5)培養(yǎng)原代細(xì)胞中出現(xiàn)小黑點,,可能是原代組織中的雜質(zhì),多次傳代可以消除,。
細(xì)胞培養(yǎng)中如何防止黑點生成?
(1) 盡可能地減少血清凍融次數(shù),。
(2) 培養(yǎng)基無需37℃水浴。
(3) 培養(yǎng)基保持jiaPH值7.0- 7.2,。
(4) 嚴(yán)格控制配制培養(yǎng)基的水質(zhì),,容器定期刷洗。
(5) 掌握細(xì)胞傳代的jia時機(jī),,細(xì)胞切勿生長過老,。
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