除去包裝沾染的污垢后,，先用熱肥皂水刷洗,，流水沖凈，再浸泡于１～２％的工業(yè)鹽酸中數(shù)小時(shí),，使游離的堿性物質(zhì)除去,，再以流水沖凈。對(duì)容量較大的器皿,，如大燒瓶,、量筒等，洗凈后注入濃鹽酸少許，轉(zhuǎn)動(dòng)容器使其內(nèi)部表面均沾有鹽酸,，數(shù)分鐘后傾去鹽酸,，再以流水沖凈，倒置于洗滌架上將水空干,，即可使用,。

2、用過的玻璃器皿

凡確無病原菌或未被帶菌物污染的器皿,，使用后可隨時(shí)沖洗,，吸取過化學(xué)試劑的吸管，可先浸泡于清水中,，待到一定數(shù)量后再集中進(jìn)行清洗,。有可能被病原菌污染的器皿，必須經(jīng)過適當(dāng)消毒后,，將污垢除去,，用皂液洗刷，再用流水沖洗干凈,。若用皂液未能洗凈的器皿,，可用洗液浸泡適當(dāng)時(shí)間后再用清水洗凈。洗液的主要成份是重鉻酸鉀和濃流酸,，其作用是將有機(jī)物氧化成可溶性物質(zhì),，以便沖洗。洗液有很強(qiáng)的腐蝕作用,，使用時(shí)應(yīng)特別小心,，避免濺到衣服、身體和其他物品上,。

二,、培養(yǎng)基的類型

在實(shí)驗(yàn)室中配制的適合微生物生長繁殖或累積代謝產(chǎn)物的任何營養(yǎng)基質(zhì)，都叫做培養(yǎng)基(Media),。由于各類微生物對(duì)營養(yǎng)的要求不同,，培養(yǎng)目的和檢測(cè)需要不同，因而培養(yǎng)基的種類很多,。我們可根據(jù)某種標(biāo)準(zhǔn),，將種類繁多的培養(yǎng)基劃分為若干類型。

1,、根據(jù)對(duì)培養(yǎng)基組成物質(zhì)的化學(xué)成分是否*了解來區(qū)分,，可以將培養(yǎng)基分為天然培養(yǎng)基、合成培養(yǎng)基和半合成培養(yǎng)基,。

a.天然培養(yǎng)基天然培養(yǎng)基是指利用各種動(dòng),、植物或微生物的原料，其成分難以確切知道,。用作這種培養(yǎng)基的主要原料有：麥芽汁,、蛋白胨、酵母膏,、玉米粉,、麩皮、各種餅粉,、馬鈴薯,、牛奶、血清等,。用這些物質(zhì)配成的培養(yǎng)基雖然不能確切知道它的化學(xué)成分,，但一般來講，營養(yǎng)是比較豐富的,，微生物生長旺盛,，而且來源廣泛，配制方便,，所以較為常用,，尤其適合于配制實(shí)驗(yàn)室常用的培養(yǎng)基。這種培養(yǎng)基的穩(wěn)定性常受生產(chǎn)廠或批號(hào)等因素的影響,。

b.合成培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基是一類化學(xué)成分和數(shù)量*知道的培養(yǎng)基,，它是用已知化學(xué)成分的化學(xué)藥品配制而成。這類培養(yǎng)基化學(xué)成分,、重復(fù)性強(qiáng),，但價(jià)格昂貴，而微生物又生長緩慢,，所以它只適用于做一些科學(xué)研究,，例如營養(yǎng)、代謝的研究,。

c.半合成培養(yǎng)基在合成培養(yǎng)基中,，加入某種或幾種天然成分；或者在天然培養(yǎng)基中,，加入一種或幾種已知成分的化學(xué)藥品即成半合成培養(yǎng)基,。例如馬鈴薯蔗糖培養(yǎng)基等。這種培養(yǎng)基在生產(chǎn)實(shí)踐和實(shí)驗(yàn)室中使用多,。

2,、根據(jù)培養(yǎng)基的物理狀態(tài)來區(qū)分，可以分為固體培養(yǎng)基,、液體培養(yǎng)基和半固體培養(yǎng)基,。

a.液體培養(yǎng)基所配制的培養(yǎng)基是液態(tài)的,，其中的成分基本上溶于水，沒有明顯的固形物,，液體培養(yǎng)基營養(yǎng)成分分布均勻,，易于控制微生物的生長代謝狀態(tài)。

b.固體培養(yǎng)基在液體培養(yǎng)基中加入適量的凝固劑即成固體培養(yǎng)基,。常用作凝固劑的物質(zhì)有瓊脂,、明膠、硅膠等,，以瓊脂為常用,。固體培養(yǎng)基在實(shí)際中用得十分廣泛。在實(shí)驗(yàn)室中,，它被用作微生物的分離,、鑒定、檢驗(yàn)雜菌,、計(jì)數(shù),、保藏、生物測(cè)定等,。

c.半固體培養(yǎng)基如果把少量的凝固劑加入到液體培養(yǎng)基中,，就制成了半固體培養(yǎng)基。以瓊脂為例,，它的用量在0.2~1%之間,。這種培養(yǎng)基有時(shí)可用來觀察微生物的動(dòng)力，有時(shí)用來保藏菌種,。

3,、根據(jù)培養(yǎng)基的用途來區(qū)分，可分為選擇培養(yǎng)基,、增殖培養(yǎng)基,、鑒別培養(yǎng)基等。

a.選擇培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種物質(zhì)以殺死或抑制不需要的菌種生長的培養(yǎng)基,，稱之為選擇培養(yǎng)基,。如鏈霉素、氯霉素等抑制原核微生物的生長,；而制霉菌素,、灰黃霉素等能抑制真核微生物的生長；結(jié)晶紫能抑制革蘭氏陽性細(xì)菌的生長等,。

b.增殖培養(yǎng)基在自然界中,，不同種的微生物常生活在一起，為了分離我們所需要的微生物,，在普通培養(yǎng)基中加入一些某種微生物特別喜歡的營養(yǎng)物質(zhì),，以增加這種微生物的繁殖速度,，逐漸淘汰其它微生物，這種培養(yǎng)基稱為增殖培養(yǎng)基,，這種培養(yǎng)基常用于菌種篩選和選擇增菌中,。在某種程度上講，增殖培養(yǎng)基也是一種選擇培養(yǎng)基,。

c.鑒別培養(yǎng)基在培養(yǎng)基中加入某種試劑或化學(xué)藥品,，使難以區(qū)分的微生物經(jīng)培養(yǎng)后呈現(xiàn)出明顯差別,，因而有助開快速鑒別某種微生物,。這樣的培養(yǎng)基稱之為鑒別培養(yǎng)基。例如用以檢查飲水和乳品中是否含有腸道致病菌的伊紅美藍(lán)培養(yǎng)基就是一種常用的鑒別性培養(yǎng)基,。

有些培養(yǎng)基是具有選擇和鑒別雙重作用,。例如食品檢驗(yàn)中常用的麥康凱培養(yǎng)基是一例。它含有膽鹽,、乳糖和中性紅,。膽鹽具有抑制腸道菌以外的細(xì)菌的作用（選擇性），乳糖和中性紅（指示劑）能幫助區(qū)別乳糖發(fā)酵腸道菌（如大腸桿菌）和不能發(fā)酵乳糖的腸道致病菌（如沙門氏菌和志賀氏菌）,。

另外,，根據(jù)培養(yǎng)基的營養(yǎng)成分是否“*”，可以分為基本培養(yǎng)基,、*培養(yǎng)基和補(bǔ)充培養(yǎng)基,，這類術(shù)語主要是用在微生物遺傳學(xué)中。根據(jù)培養(yǎng)基用于生產(chǎn)的目的來區(qū)分,，可以分為種子培養(yǎng)基和發(fā)酵培養(yǎng)基,。還有專門用于培養(yǎng)病毒等寄生微生物的活組織培養(yǎng)基，如雞胚等,；專門用于培養(yǎng)自養(yǎng)微生物的無機(jī)鹽培養(yǎng)基等,。

三、培養(yǎng)基制備的基本方法和注意事項(xiàng)

1,、培養(yǎng)基配方的選定

同一種培養(yǎng)基的配方在不同著作中常會(huì)有某些差別,。因此，除所用的是標(biāo)準(zhǔn)方法,，應(yīng)嚴(yán)格按其規(guī)定進(jìn)行配制外,，一般均應(yīng)盡量收集有關(guān)資料，加以比較核對(duì),，再依據(jù)自己的使用目的,，加以選用，記錄其來源,。

2,、培養(yǎng)基的制備記錄

每次制備培養(yǎng)基均應(yīng)有記錄,，包括培養(yǎng)基名稱，配方及其來源,，和各種成份的牌號(hào),，終pH值、消毒的溫度和時(shí)間制備的日期和制備者等,，記錄應(yīng)復(fù)制一份,，原記錄保存?zhèn)洳椋瑥?fù)制記錄隨制好的培養(yǎng)基一同存放,、以防發(fā)生混亂,。

3、培養(yǎng)基pH的初步調(diào)正

因培養(yǎng)基在加熱消毒過程中,、pH會(huì)有所變化,，培養(yǎng)基各成分*溶解后，應(yīng)進(jìn)行PH的初步調(diào)正,。例如,，牛肉浸液約可降低pH0.2，而腸浸液pH卻會(huì)有顯著的升高,。因此,，對(duì)這個(gè)步驟，操作者應(yīng)隨時(shí)注意探索經(jīng)驗(yàn),、以期能掌握培養(yǎng)基的終PH,，保證培養(yǎng)基的質(zhì)量。PH調(diào)整后,，還應(yīng)將培養(yǎng)基煮沸數(shù)分鐘,，以利培養(yǎng)基沉淀物的析出。

4,、培養(yǎng)基的過濾澄清

液體培養(yǎng)基必須澄清,，瓊脂培養(yǎng)基也應(yīng)透明無顯著沉淀，因此,，須要采用過濾或其它澄清方法以達(dá)到此項(xiàng)要求,。一般液體培養(yǎng)基可用濾紙過濾法，濾紙應(yīng)折疊成折扇或漏斗形,，以避免因液壓不均勻而引起濾紙破裂,。

瓊脂培養(yǎng)基可用清潔的白色薄絨布趁熱過濾。亦可用中間夾有薄層吸水棉的雙層紗布過濾,。新制肉,、肝、血和土豆等浸液時(shí),、則須先用絨布將碎渣濾去,，再用濾紙反復(fù)過濾,。如過濾法不能達(dá)到澄清要求、則須用蛋清澄清法,。即將冷卻至55~60°C的培養(yǎng)基放入大的三角燒瓶內(nèi),，裝入量不得超過燒瓶容量的1/2，每1000ml培養(yǎng)基加入1~2個(gè)雞蛋的蛋白,，強(qiáng)力振搖3~5分鐘,，置高壓蒸汽滅菌器中、121°C加熱20分鐘,、取出趁熱以絨布過濾即可,。

5、培養(yǎng)基的分裝

培養(yǎng)基的分裝,，應(yīng)按使用的目的和要求,，分裝于試管,、燒瓶等適當(dāng)容器內(nèi),。分裝量不得超過容器裝盛量的2/3。容器口可用墊有防濕紙的棉塞封堵,，其外還須用防水紙包扎（現(xiàn)試管一般多有用螺旋蓋者）,。分裝時(shí)能使用半自動(dòng)或電動(dòng)的定量分裝器。分裝瓊脂斜面培養(yǎng)基時(shí),，分裝量應(yīng)以能形成2/3底層和1/3斜面的量為洽當(dāng),。分裝容器應(yīng)預(yù)先清洗干凈并經(jīng)干烤消毒，以利于培養(yǎng)基的*滅菌,。每批培養(yǎng)基應(yīng)另外分裝20ml培養(yǎng)基于一小玻璃瓶中,，隨該批培養(yǎng)基同時(shí)滅菌，以為測(cè)定該批培養(yǎng)基終pH之用,。

6,、培養(yǎng)基的滅菌

一般培養(yǎng)基可采用121°C高壓蒸汽滅菌15分鐘的方法。在各種培養(yǎng)基制備方法中,，如無特殊規(guī)定,，即可用此法滅菌。

某些畏熱成分,，如糖類,，應(yīng)另行配成20%或更高的濃液，以過濾或間歇滅菌法消毒,，以后再用無菌操作技術(shù),、定量加于培養(yǎng)基。明膠培養(yǎng)基亦應(yīng)用較低溫度滅菌,。血液,、體液和抗生素等則應(yīng)以無菌操作技術(shù)抽取和加入于經(jīng)冷卻約50°C左右的培養(yǎng)基中,。

瓊脂斜面培養(yǎng)基應(yīng)在滅菌后立即取出，冷至55℃-60℃時(shí),，擺置成適當(dāng)斜面,，待其自然凝固。

7,、培養(yǎng)基的質(zhì)量測(cè)試

每批培養(yǎng)基制備好以后,，應(yīng)仔細(xì)檢查一遍，如發(fā)現(xiàn)破裂,、水分浸入,、色澤異常、棉塞被培養(yǎng)基沾染等,、均應(yīng)挑出棄去,。并測(cè)定其終pH。

將全部培養(yǎng)基放入36±1°C恒溫箱培養(yǎng)過夜,，如發(fā)現(xiàn)有菌生長,，即棄去。

用有關(guān)的標(biāo)準(zhǔn)菌株接種1~2管或瓶培養(yǎng)基,，培養(yǎng)24~48小時(shí),，如無菌生長或生長不好。應(yīng)追查原因并重復(fù)接種一次,，如結(jié)果仍同前,，則該批培養(yǎng)基即應(yīng)棄去，不能使用,。

8,、培養(yǎng)基的保存

培養(yǎng)基應(yīng)存放于冷暗處，能放于普通冰箱內(nèi),。放置時(shí)間不宜超過一周,，傾注的平板培養(yǎng)基不宜超過3天。每批培養(yǎng)基均必須附有該批培養(yǎng)基制備記錄副頁或明顯標(biāo)簽,。

9,、培養(yǎng)基成分的稱取

培養(yǎng)基的各種成分必須稱取并要注意防止錯(cuò)亂，一次完成,，不要中斷,。可將配方置于傍側(cè),，每稱完一種成分即在配方面軍做出記號(hào),，并將所需稱取的藥品一次取齊，置于左側(cè)，每種稱取完畢后,，即移放于右側(cè),。*稱取完畢后，還應(yīng)進(jìn)行一次檢查,。

10,、培養(yǎng)基各成份的混合和溶化

培養(yǎng)基所用化學(xué)藥品均應(yīng)是化學(xué)純的。使用的蒸煮鍋不得為銅鍋或鐵鍋,，以防有微量銅或鐵混入培養(yǎng)基中,，使細(xì)菌不易生長。使用不銹鋼鍋加熱溶化,，可放入大燒杯或大燒瓶中置高壓蒸汽滅菌器或流動(dòng)蒸汽消毒器中蒸煮溶化,。在鍋中溶化時(shí)、可先用溫水加熱并隨時(shí)擾動(dòng),、以防焦化,、如發(fā)現(xiàn)有焦化現(xiàn)象、該培養(yǎng)基即不能使用,，應(yīng)重新制備,。待大部分固體成分溶化后，再用較小火力使所有成分*溶化,，迄至煮沸,。如為瓊脂溶化,，用另一部分水溶化其它成分,，然后將兩溶液充分混合。在加熱溶化過程中,，因蒸發(fā)而丟失的水分,，后必須加以補(bǔ)足。

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