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新手培養(yǎng)細胞注意事項
閱讀：2089發(fā)布時間：2019-1-4
培養(yǎng)細胞是醫(yī)學研究生的基本功,。細胞嬌貴，一不小心容易出問題,。作為新手培養(yǎng)細胞要注意那些呢,。
1、不要燒瓶口,。大多數(shù)人都喜歡在酒精燈的火焰上關瓶子,，覺得這樣可以避免污染。不知道大家是不是有培養(yǎng)基怎么越用越發(fā)紫的困惑,？知道為什么嗎,？燒瓶口燒的。培養(yǎng)基一般都是用碳酸/碳酸氫跟作緩沖體系,。瓶口在火焰上的時候,，熾熱的空氣進入瓶內(nèi)。塞緊塞子放入冰箱后,，空氣變冷,，壓力驟降，培養(yǎng)基中的碳酸就會轉(zhuǎn)化成二氧化碳,，釋放出來,。培養(yǎng)基中的碳酸少了，當然會變堿,。如果不燒瓶口的話,，你會發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)液變堿的速度會大大減慢。（當然多多少少還是會有一點越用越堿,，因為室溫還是比冰箱內(nèi)的溫度高）
其實燒瓶口防止污染純粹是心理安慰,。不妨試一下把手指在火上晃幾下,，你會發(fā)現(xiàn)根本就不會燒疼。如果有細菌的話,，這么晃兩下也燒不死多少,。要想燒死全部細菌，除非把瓶口和塞子燒紅,。
2,、 不要頻繁看細胞。對于初學者而言,，養(yǎng)細胞就像養(yǎng)孩子一樣,，有空就要去看看。細胞越是養(yǎng)不好,，就越是經(jīng)常去看,。實際上看細胞對細胞的生長沒有任何好處，特別是對原代細胞或是免疫磁珠分選后,，密度特別低的細胞,。培養(yǎng)基中的生長因子是非常有限的。細胞好不容易自分泌一點兒促生長的因子在其周圍,，形成有利于生長的局部環(huán)境,。你跑去看細胞，培養(yǎng)瓶這么一晃,，把因子都給晃散了,。新手一天到晚看細胞，細胞老是長不好,。老手細胞一扔好幾天不管,，細胞瘋長,。
3,、 不要怕消化。在傳代的時候,，初學者往往生怕細胞消化過度,，早早地終止消化。細胞沒下來就使勁吹燈,，吹得滿瓶子都是氣泡,。一般看來，用力吹打?qū)毎膿p傷比消化更大,。做血管平滑肌原代的時候,，37度消化過夜，細胞也沒事,。通常等細胞*變圓后才中止消化,。細胞輕輕一晃就能下來,。還有，動作要輕柔,，盡量不要產(chǎn)生氣泡,。氣泡在破裂時的機械應力相當大，對細胞的傷害也是很大的,。
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