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MSC細胞培養(yǎng)基  現(xiàn)貨熱賣 HY STEMCELL自研        貨號：E8725F

規(guī)格：450+50mL/套

用途：用于骨髓、臍帶,、臍血,、胎盤,、脂肪等各種組織來源的人間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cell, MSCs）的培養(yǎng)，包括原代細胞的培養(yǎng)和傳代細胞的擴增,。本產(chǎn)品尤其適于臨床級MSCs的培養(yǎng),。經(jīng)該體系培養(yǎng)的MSCs可用于臨床治療等用途。

產(chǎn)品介紹：

本產(chǎn)品包括以下8種明確公開組份：

DMEM/F12 base        Essential GFs

Glutamine                  Transferrin

NaHCO3                     Albumin

Selenium                     Insulin

其中Essential GFs為十余種蛋白生長因子,，是人間充質(zhì)干細胞（mesenchymal stem cell, MSCs）生長所必需的,，以Cocktail形式融入E8725F無血清培養(yǎng)基中。

*培養(yǎng)基的配制：

將*溶解的CCGmHuM® Human MSCs Supplement Medium（10x）細胞因子添加物加入到相應體積的基礎培養(yǎng)基中,，充分混合均勻,，制備成*培養(yǎng)基。培養(yǎng)基和CCGmHuM® Human MSCs Supplement Medium（10x）細胞因子添加物的混合比例為9:1,，即每9mL基礎培養(yǎng)基需要添加1mL細胞因子添加物,。

為維持添加物中細胞生長因子的活性，請將配制好的*培養(yǎng)基置于4℃避光保存,，儲存時間不宜超過4周,，1周內(nèi)用完最佳。

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技術指標：

1.物理性狀：添加劑呈淡黃色，澄清透明,，PH7.0~7.6,。

2.細菌培養(yǎng)：陰性

3.支原體培養(yǎng)：陰性

4.HBV-sAg：陰性

5.HIV-Ab：陰性

6.HCV-Ab：陰性

7.梅毒螺旋體抗體：陰性

8.牛血清白蛋白：陰性

9.熱源內(nèi)毒素：小于1EU/mL

10.細胞生長：細胞為梭形，呈指紋狀或螺旋狀生長,；原代細胞貼壁生長和傳代細胞生長良好,。

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人臍帶間充質(zhì)干細胞培養(yǎng)：

         1.按照常規(guī)方法分離人臍帶Walton膠中的細胞。

★ 注意：從臍帶組織中分離細胞的方法,，嚴重影響最終所得細胞純度和質(zhì)量,。臍帶組織中含有內(nèi)皮細胞、上皮細胞,、平滑肌細胞,、外膜細胞、間充質(zhì)干細胞乃至單核巨噬細胞等,。以上細胞均可貼壁,，有些生長速度也較快,，且細胞也多呈紡錘形。這些細胞不易與間充質(zhì)干細胞區(qū)分,。建議：從臍帶剝離Walton膠并剪切成小塊的過程中用生理鹽水反復漂洗干凈 或 使用酶消化法進行間充質(zhì)干細胞的分離,，以保障所得細胞純度。

2.PBS清洗細胞1次,。

3.棄上清,，用*培養(yǎng)基重懸細胞。

4.細胞計數(shù),，調(diào)整細胞濃度為5×106/mL,。

5.根據(jù)擬采用培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿的底面積，計算接種細胞總量,。一般而言,，細胞來源不同，接種密度可適當調(diào)整,，5～7.5×105/cm2適于多數(shù)情況下人臍帶間充質(zhì)干細胞的培養(yǎng),。

6.將接種好的細胞置于5% CO2和100%相對濕度的37℃培養(yǎng)箱培養(yǎng)。根據(jù)細胞生長狀況換液,。

★ 注意：一般文獻推薦培養(yǎng)48小時后去除非貼壁細胞,。我們建議：培養(yǎng)次日觀察有無污染；如無污染現(xiàn)象,，可持續(xù)培養(yǎng)5～7天,，或至培養(yǎng)基顏色變黃。之后,，去除非貼壁細胞，加入新鮮的*培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng),。

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