ELISA試劑盒在國內(nèi)有許多種叫法,，例如：ELISA檢測試劑盒、ELISA Kit,、酶聯(lián)免疫試劑盒,、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒,、酶免試劑盒等,，比較常見的叫法是ELISA檢測試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測定試劑盒等,。ELISA試劑盒有幾種檢測方法,？
雙抗體夾心法
1.包被：用0.05MPH9.牰碳酸鹽包被緩沖液將抗體稀釋至蛋白質(zhì)含量為1～10μg/ml。在每個聚苯乙烯板的反應(yīng)孔中加0.1ml,，4℃過夜,。次日，棄去孔內(nèi)溶液,，用洗滌緩沖液洗3次,，每次3分鐘。（簡稱洗滌,，下同）,。
2.加樣：加一定稀釋的待檢樣品0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,，置37℃孵育1小時。然后洗滌,。（同時做空白孔,，陰性對照孔及陽性對照孔）。
3.加酶標抗體：于各反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標抗體（經(jīng)滴定后的稀釋度）0.1ml,。37℃孵育0.5～1小時，洗滌,。
4.加底物液顯色：于各反應(yīng)孔中加入臨時配制的TMB底物溶液0.1ml,，37℃10～30分鐘。
5.終止反應(yīng)：于各反應(yīng)孔中加入2M硫酸0.05ml,。
6.結(jié)果判定：可于白色背景上,，直接用肉眼觀察結(jié)果：反應(yīng)孔內(nèi)顏色越深，陽性程度越強,，陰性反應(yīng)為無色或極淺,，依據(jù)所呈顏色的深淺，以“+”,、“-”號表示,。也可測OD值：在ELISA檢測儀上，于450nm（若以ABTS顯色,，則410nm）處，以空白對照孔調(diào)零后測各孔OD值,，若大于規(guī)定的陰性對照OD值的2.1倍,，即為陽性。
間接法
1.用包被緩沖液將已知抗原稀釋至1～10μg/ml,，每孔加0.1ml,，4℃過夜；
2.次日洗滌3次,；
3.加一定稀釋的待檢樣品（未知抗體）0.1ml于上述已包被之反應(yīng)孔中,置37℃孵育1小時,洗滌,；
4.（同時做空白、陰性及陽性孔對照）于反應(yīng)孔中,，加入新鮮稀釋的酶標第二抗體（抗抗體）0.1ml,；
5.37℃孵育35-60分鐘，洗滌,；
6.’最后一遍用DDW洗滌,。其余步驟同“雙抗體夾心法”的4、5,、6,。
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