淺析熱電核磁共振波譜儀的五個(gè)操作步驟
閱讀:577 發(fā)布時(shí)間:2022-11-24
熱電核磁共振波譜儀來源于原子核能級(jí)間的躍遷,。只有置于強(qiáng)磁場(chǎng)中的某些原子核才會(huì)發(fā)生能級(jí)分裂,當(dāng)吸收的輻射能量與核能級(jí)差相等時(shí),,就發(fā)生能級(jí)躍遷而產(chǎn)生信號(hào),。
用一定頻率的電磁波對(duì)樣品進(jìn)行照射,可使特定化學(xué)結(jié)構(gòu)環(huán)境中的原子核實(shí)現(xiàn)共振躍遷,,在照射掃描中記錄發(fā)生共振時(shí)的信號(hào)位置和強(qiáng)度,,就得到核磁共振譜。共振信號(hào)位置反映樣品分子的局部結(jié)構(gòu)(如官能團(tuán),,分子構(gòu)象等),,信號(hào)強(qiáng)度則往往與有關(guān)原子核在樣品中存在的量有關(guān)。
熱電核磁共振波譜儀是能夠在原子分辨率下測(cè)定溶液中生物大分子三維結(jié)構(gòu)的方法,在研究蛋白質(zhì)和氨基酸的結(jié)構(gòu),、動(dòng)力學(xué)以及蛋白質(zhì)相互作用等方面發(fā)揮著重要作用,,利用核磁譜研究蛋白質(zhì),已經(jīng)成為結(jié)構(gòu)生物學(xué)領(lǐng)域的一項(xiàng)重要技術(shù)手段,。依據(jù)不同食品的特定參考標(biāo)準(zhǔn),,在食品品質(zhì)鑒定方面也得到有效應(yīng)用,包括鑒別果蔬和谷物在生長(zhǎng)過程中及采摘后的內(nèi)部品質(zhì),、成熟度,、內(nèi)部缺陷等,以及肉類,、酒類,、油脂類食品的原產(chǎn)地和品質(zhì)優(yōu)劣等。
熱電核磁共振波譜儀的操作步驟:
1,、放置樣品
首先要有足夠的樣品量,,一般300兆核磁共振測(cè)氫譜需2-10mg,500兆核磁共振測(cè)氫譜需0,、5mg以上,,碳譜需要的樣品量更大。選擇適當(dāng)核磁共振的溶解,,使樣品*解,。如果用5mm的核磁管,氘代試劑的量要使液面高度在3cm以上,。
然后核磁管插入轉(zhuǎn)子放入量尺量深到底,;若溶液高度不能蓋滿量尺的黑色標(biāo)線,可稍提核磁管,,使溶液中間位置與量尺中間刻度一致,。
將帶有轉(zhuǎn)子的核磁管小心放入充滿氣流的磁鐵入口,"down"下,。核磁管的旋轉(zhuǎn)可以消除磁場(chǎng)在XY方向的不均勻度,,提高分辨率。
2,、核磁共振鎖場(chǎng)
按鎖場(chǎng)鈕,,利用氘代試劑氘信號(hào),使鎖場(chǎng)單元工作,,鎖住磁場(chǎng),。鎖場(chǎng)的目的使為了使磁場(chǎng)穩(wěn)定。
3,、核磁共振調(diào)節(jié)勻場(chǎng)
在操作鍵盤上標(biāo)有X,、Y,、Z、XY,、X2-Y2和Z3等字母,,表示一階、二階,、三階的不同方向磁場(chǎng)的均勻度,。
調(diào)節(jié)勻場(chǎng)時(shí),一般先調(diào)節(jié)Z1,、Z2,、Z3和Z4,然后調(diào)節(jié)X,、Y方向,。勻場(chǎng)的目的是找到各方向之間配合的*位置。另外,,各高階按鈕在儀器驗(yàn)收時(shí)已經(jīng)調(diào)好,,平時(shí)不要隨便調(diào)試,否則一旦調(diào)亂,,很難找到*配合,。
4、核磁共振探頭調(diào)諧
為了獲得zui高的靈敏度,,要進(jìn)行探頭調(diào)諧,。通過反復(fù)的調(diào)諧和匹配,使接收到的功率zui大,,反射的功率zui小,。
5、核磁共振數(shù)據(jù)的采集與處理
輸入采集命令及可開始采樣,。采樣結(jié)果為FID信號(hào),,即時(shí)域譜;傅立葉變換,,將時(shí)域譜變成頻域譜,。然后進(jìn)行相位糾正使峰型對(duì)稱,,基線校正使基線平滑,,域值線以上的峰標(biāo)出化學(xué)位移,予以積分(注意區(qū)分氘代試劑溶劑峰及雜質(zhì)峰),。