賽默飛熒光光度計(jì)由以下四個部分組成
閱讀:942 發(fā)布時間:2021-10-13
賽默飛熒光光度計(jì)是用于掃描液相熒光標(biāo)記物所發(fā)出的熒光光譜的一種儀器,,有濾光片熒光計(jì),、濾光片-單色器熒光計(jì)等,,通常均由以下四個部分組成:激發(fā)光源、用于選擇激發(fā)光波長和熒光波長的單色器,、樣品池及測量熒光的檢測器,。
賽默飛熒光光度計(jì)結(jié)構(gòu)組成:
一、激發(fā)光源
對激發(fā)光源主要考慮其穩(wěn)定性和強(qiáng)度,,因?yàn)楣庠吹姆€(wěn)定性直接影響測量的重復(fù)性和精確度,,而光源的強(qiáng)度又直接影響測定的靈敏度,。熒光測量中常用的光源包括高壓汞燈或氙燈。氙燈產(chǎn)生強(qiáng)烈的連續(xù)輻射,,其波長范圍在250~700nm,;高壓汞燈發(fā)射365 nm、405 nm,、436 nm,、546 nm、579 nm,、690nm和734 nm的線狀譜線,,測量中常用365 nm、405 nm,、436 nm三條譜線,。目前大部分熒光分光光度計(jì)都采用150W和500W的氙燈作光源;現(xiàn)代熒光儀器有采用12 V50W的新型溴鎢燈作光源,,在300~700nm波段發(fā)射連續(xù)光譜,。此外,20世紀(jì)70年代開始用激光作為激發(fā)光源,,激光光源單色性好,、光強(qiáng)度大、脈沖激光的光照時間短,,可以避免某些感光物質(zhì)的分解,。
二、單色器
賽默飛熒光光度計(jì)有兩個單色器,,激發(fā)單色器(第一單色器)和熒光單色器(第二單色器),。第一個單色器的作用是將不需要的光除去,使需要的激發(fā)光透過而照射到樣品池,,第二個濾光片將由激發(fā)光所發(fā)生的反射光,、瑞利散射光、拉曼散射光和由溶液中雜質(zhì)所發(fā)生大多數(shù)的熒光濾去,。濾光片熒光計(jì)采用濾光片做單色器,,結(jié)構(gòu)簡單,價格便宜,,用于已知組分樣品的定量分析,,不能提供激發(fā)光譜或熒光光譜。熒光分光光度計(jì)都采用光柵分光,,可以獲得單色性好的激發(fā)光,,并能分出某一波長的熒光,以減少干擾,,而且可以掃描激發(fā)光譜或熒光光譜,。
三,、樣品池
熒光分析用的樣品池須用低熒光材料制成,通常用石英,,四面均透光,。形狀有正方形、長方形或圓形,,但常用正方形樣品池,,因其散射干擾較少。
四,、檢測器
賽默飛熒光光度計(jì)中的檢測器有較高的靈敏度,,一般用光電倍增管(PMT)做檢測器。為了消除激發(fā)光對熒光測量的干擾,,在儀器中,,檢測光路與激發(fā)光路是相互垂直的。