日韩av大片在线观看欧美成人不卡|午夜先锋看片|中国女人18毛片水多|免费xx高潮喷水|国产大片美女av|丰满老熟妇好大bbbbbbbbbbb|人妻上司四区|japanese人妻少妇乱中文|少妇做爰喷水高潮受不了|美女人妻被颜射的视频,亚洲国产精品久久艾草一,俄罗斯6一一11萝裸体自慰,午夜三级理论在线观看无码

英文名稱： MTT
中文名稱： 噻唑蘭
MF： C18H16BrN5S
MW： 414.32
CAS： 298-93-1
1g 5g 10g 量大優(yōu)惠

實(shí)驗(yàn)方法明確問題
⒈選擇適當(dāng)?shù)募?xì)胞接種濃度,。一般情況下,，96孔培養(yǎng)板的一內(nèi)貼壁細(xì)胞長滿時約有105個細(xì)胞。但由于不同細(xì)胞貼壁后面積差異很大,，因此,，在進(jìn)行MTT試驗(yàn)前，要進(jìn)行預(yù)實(shí)驗(yàn)檢測其貼壁率,、倍增時間以及不同接種細(xì)胞數(shù)條件下的生長曲線,，確定試驗(yàn)中每孔的接種細(xì)胞數(shù)和培養(yǎng)時間，以保證培養(yǎng)終止致細(xì)胞過滿,。這樣,，才能保證MTT結(jié)晶形成酌量與細(xì)胞數(shù)呈的線性關(guān)系。否則細(xì)胞數(shù)太多敏感性降低,，太少觀察不到差異,。
⒉藥物濃度的設(shè)定。一定要多看文獻(xiàn),，參考別人的結(jié)果再定個比較大的范圍先初篩,。根據(jù)自己初篩的結(jié)果縮小濃度和時間范圍再細(xì)篩。切記,！否則,，可能你用的時間和濃度根本不是藥物的有效濃度和時間。
⒊ 時間點(diǎn)的設(shè)定,。在不同時間點(diǎn)的測定OD值,，輸入excel表，zui后得到不同時間點(diǎn)的抑制率變化情況,，畫出變化的曲線,，曲線什么時候變得平坦了（到了平臺期）那個時間點(diǎn)應(yīng)該就是的時間點(diǎn)（因?yàn)檫@個時候的細(xì)胞增殖抑制表現(xiàn)的*）。
⒋培養(yǎng)時間,。200ul的培養(yǎng)液對于10的4～5次方的增殖期細(xì)胞來說，很難維持68h,，如果營養(yǎng)不夠的話,，細(xì)胞會由增殖期漸漸趨向G0期而趨于靜止，影響結(jié)果,，我們是在48h換液的,。
⒌MTT法只能測定細(xì)胞相對數(shù)和相對活力,，不能測定細(xì)胞數(shù)。做MTT時,，盡量無菌操作,，因?yàn)榧?xì)菌也可以導(dǎo)致MTT比色OD值的升高。
⒍理論未必都是對的,。要根據(jù)自己的實(shí)際情況調(diào)整,。
⒎實(shí)驗(yàn)時應(yīng)設(shè)置調(diào)零孔，對照孔,，加藥孔,。調(diào)零孔加培養(yǎng)基、MTT,、二甲基亞砜,。對照孔和加藥孔都要加細(xì)胞、培養(yǎng)液,、MTT,、二甲基亞砜，不同的是對照孔加溶解藥物的介質(zhì),，而加藥組加入不同濃度的藥物,。
⒏避免血清干擾。用含15%胎牛血清培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞時,，高的血清物質(zhì)會影響試驗(yàn)孔的光吸收值,。由于試驗(yàn)本底增加，會試驗(yàn)敏感性,。因此,，一般選小于10%胎牛血清的培養(yǎng)液進(jìn)行。在呈色后,，盡量吸凈培養(yǎng)孔內(nèi)殘余培養(yǎng)液,。