產(chǎn)品簡介
CAS:69-78-3
1g 5g 10g
詳細介紹
英文名稱: DTNB
中文名稱: 5,5'-二硫雙(2-硝基苯甲酸)
MF: C14H8N2O8S2
MW: 396.35
CAS: 69-78-3
DTNB為Ellman試劑。它用于比色法測定生物樣 品中巰基,。它易溶于水,。在巰基化合物的存在下,無色的DTNB將被轉(zhuǎn)變成黃 色的5-巰基-2-硝基苯甲酸,。由于5-巰基-2-硝基苯甲酸在412 nm處具有zui大吸收,,DTNB的吸收光譜并不干擾巰基的測定,。
配置方法:
準確稱取0.198gDTNB用50mMNa2HPO4(pH=7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,,于暗處低溫保存?zhèn)溆?。?yīng)該注意的是配置緩沖、濃度,,儲存時要避免見光,。
應(yīng)用舉例:
半胱氨酸中自由巰基的定量檢測方法
一、試劑的配制:
1,、Tris-HCL緩沖液(0.25M):DDW準確配制后,,用鹽酸調(diào)節(jié)pH=8.3;
2,、半胱氨酸標準溶液(1mM):準確稱取0.017563gL-半胱氨酸(175.63),,用1ml甲酸溶解,以DDW定容至100ml,;
3,、DTNB(分子量:396.35)標準溶液(10mM):準確稱取0.198175gDTNB用50mMNa2HPO4(pH=7.0)配制成50ml溶液,存放于棕色瓶中,,于暗處低溫保 存?zhèn)溆?/P>
4,、DTNB分析溶液(0.1mM):由1體積10mMDTNB標準液加99體積0.25M的Tris緩沖液配制而成,現(xiàn)用現(xiàn)配,。
二,、標準曲線的制作;
1、25℃條件下,,用Tris緩沖液稀釋半胱氨酸標準液配成梯度的稀釋液(5.0ml),, 其濃度分別為:0.00mM、0.025mM,、0.05mM,、0.1mM、0.15mM,、0.2mM,;
2、取上述各濃度溶液1ml分別加入到5ml預(yù)先恒溫于25℃水中的DTNB分析溶液,,搖勻,,準確靜止10min,立即于波長412nm處測定吸光度值(A),。
根據(jù)目的蛋白的吸光度在標準曲線上讀出對應(yīng)的濃度即可
Product Name:DTNB
Product Number:D8130
Product Brand:Sigma
CAS Number:69-78-3