人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學研究的工具
閱讀:749 發(fā)布時間:2024-1-3
人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學研究和臨床診斷的實驗工具,,其原理基于酶聯(lián)免疫吸附實驗,,抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子,可以識別并結(jié)合特定的抗原,,形成抗原-抗體復合物,。Elisa試劑盒通常包含有特異性與目標抗原結(jié)合的抗體。分為直接Elisa,、間接Elisa,、競爭Elisa和間接競爭Elisa等多種類型,。
人elisa試劑盒的步驟如下:
1.固定抗原:在試驗板表面上固定抗原。通常將抗原溶液加入試驗孔并孵育,,使抗原與試驗板表面結(jié)合,。
2.阻斷:通過加入一種非特異性蛋白(如牛血清蛋白)來封閉試驗孔表面的未被固定的地方,以防止非特異性結(jié)合,。
3.添加樣品:加入含有可能存在目標抗原的樣品,樣品中的目標抗原與試板上的固定抗原結(jié)合,。
4.洗滌:洗滌試板以去除非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),。
5.加入初級抗體:加入與目標抗原結(jié)合的初級抗體。初級抗體可以是直接標記的,,也可以是未標記的。
6.洗滌:洗滌試板以去除未結(jié)合的初級抗體,。
7.加入二級抗體:加入與初級抗體結(jié)合的二級抗體,。二級抗體一般是與酶結(jié)合的抗體,如辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase,HRP)標記的抗體,。
8.洗滌:洗滌試板以去除未結(jié)合的二級抗體,。
9.加入底物:加入一種酶底物,,通常為染色底物。該底物可以與酶發(fā)生反應,,產(chǎn)生可見的顏色變化。
10.反應終止:加入酶反應終止劑,,停止底物的反應,,并保留底物的顏色變化,。
11.測量:使用光譜儀或讀板儀器測量試驗孔中底物的顏色強度,該強度與目標抗原的濃度相關,。
通過測量底物的顏色強度,,可以確定樣品中目標抗原的含量。人elisa試劑盒的靈敏度高,,可以檢測低濃度的抗原,,并具有分析簡單,、高通量的優(yōu)點,,因此被廣泛應用于醫(yī)學診斷和科學研究領域,。