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人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學(xué)研究的工具
閱讀：721 發(fā)布時(shí)間：2024-1-3
人elisa試劑盒是常用于生物醫(yī)學(xué)研究和臨床診斷的實(shí)驗(yàn)工具,，其原理基于酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)，抗體是免疫系統(tǒng)產(chǎn)生的蛋白質(zhì)分子,，可以識(shí)別并結(jié)合特定的抗原,，形成抗原-抗體復(fù)合物。Elisa試劑盒通常包含有特異性與目標(biāo)抗原結(jié)合的抗體,。分為直接Elisa,、間接Elisa,、競(jìng)爭(zhēng)Elisa和間接競(jìng)爭(zhēng)Elisa等多種類型。
人elisa試劑盒的步驟如下：
1.固定抗原：在試驗(yàn)板表面上固定抗原,。通常將抗原溶液加入試驗(yàn)孔并孵育,，使抗原與試驗(yàn)板表面結(jié)合。
2.阻斷：通過加入一種非特異性蛋白(如牛血清蛋白)來封閉試驗(yàn)孔表面的未被固定的地方,，以防止非特異性結(jié)合,。
3.添加樣品：加入含有可能存在目標(biāo)抗原的樣品，樣品中的目標(biāo)抗原與試板上的固定抗原結(jié)合,。
4.洗滌：洗滌試板以去除非特異性結(jié)合的蛋白質(zhì)和其他雜質(zhì),。
5.加入初級(jí)抗體：加入與目標(biāo)抗原結(jié)合的初級(jí)抗體。初級(jí)抗體可以是直接標(biāo)記的,，也可以是未標(biāo)記的,。
6.洗滌：洗滌試板以去除未結(jié)合的初級(jí)抗體。
7.加入二級(jí)抗體：加入與初級(jí)抗體結(jié)合的二級(jí)抗體,。二級(jí)抗體一般是與酶結(jié)合的抗體,，如辣根過氧化物酶(horseradishperoxidase，HRP)標(biāo)記的抗體,。
8.洗滌：洗滌試板以去除未結(jié)合的二級(jí)抗體,。
9.加入底物：加入一種酶底物，通常為染色底物,。該底物可以與酶發(fā)生反應(yīng),，產(chǎn)生可見的顏色變化。
10.反應(yīng)終止：加入酶反應(yīng)終止劑,，停止底物的反應(yīng),，并保留底物的顏色變化。
11.測(cè)量：使用光譜儀或讀板儀器測(cè)量試驗(yàn)孔中底物的顏色強(qiáng)度,，該強(qiáng)度與目標(biāo)抗原的濃度相關(guān),。
通過測(cè)量底物的顏色強(qiáng)度，可以確定樣品中目標(biāo)抗原的含量,。人elisa試劑盒的靈敏度高,，可以檢測(cè)低濃度的抗原，并具有分析簡(jiǎn)單,、高通量的優(yōu)點(diǎn),，因此被廣泛應(yīng)用于醫(yī)學(xué)診斷和科學(xué)研究領(lǐng)域。