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關(guān)于紅細(xì)胞裂解液,,三分鐘您就懂

閱讀:1910        發(fā)布時(shí)間:2023-3-16
  紅細(xì)胞膜是由磷脂,、膽固醇,、蛋白質(zhì)等組成的雙層膜結(jié)構(gòu)。在紅細(xì)胞裂解液中,,主要包含了陰離子表面活性劑(如十二烷基磺酸鈉)和滲透壓調(diào)節(jié)物(如葡萄糖),,這些物質(zhì)可以分解紅細(xì)胞膜,使紅細(xì)胞釋放出血紅蛋白,。作用機(jī)制主要有以下幾種:滲透裂解,,通過改變細(xì)胞內(nèi)外環(huán)境的滲透壓差,使細(xì)胞溶解,;離子置換,,與細(xì)胞內(nèi)離子互相置換,從而使細(xì)胞發(fā)生溶解,;肌動(dòng)蛋白降解,,針對肌動(dòng)蛋白進(jìn)行降解,從而實(shí)現(xiàn)紅細(xì)胞的裂解,。
 
  紅細(xì)胞裂解液的應(yīng)用:
 
  (1)蛋白質(zhì)提取
 
  可用于體積小,,難以直接提取的組織和細(xì)胞類型中的蛋白質(zhì)提取,。同時(shí)水解的SDS還能夠增加樣品的可讀性。
 
  (2)紅細(xì)胞計(jì)數(shù)
 
  血液學(xué)領(lǐng)域中,,被廣泛應(yīng)用于紅細(xì)胞計(jì)數(shù)和血液分類,。將血液樣品經(jīng)過裂解后,可使紅細(xì)胞溶解,,方便計(jì)數(shù)并分析,。
 
  (3)其他應(yīng)用
 
  除此之外,還用于單核細(xì)胞分離,、細(xì)胞周期分析,、人工光合成等方面的研究。
 
  實(shí)驗(yàn)室通常采用十二烷基磺酸鈉(SDS)或三辛基氧化鋁(TOPO)等表面活性劑與葡萄糖混合作為裂解液,。將10g/l的SDS加入到20mM/L的Tris-HCl緩沖液中,,并在4℃條件下混合過夜;加入可溶性的葡萄糖達(dá)到4%(w/v)的濃度懸濁液制備完成,。紅細(xì)胞裂解液應(yīng)存放于4℃冰箱中,,避免陽光直射,因?yàn)闇囟冗^高可能會(huì)分解該液體中的葡萄糖,,導(dǎo)致失效,。此外,裂解液也需注意避免污染,,建議使用濾器或滅菌裝置來凈化,。一般情況下,儲(chǔ)存期限不超過12個(gè)月,。

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