您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
如何將自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象運(yùn)用到報(bào)告基因中,？
對(duì)于自然界中的生物發(fā)光現(xiàn)象，大家應(yīng)該都是比較熟悉的,，其廣泛存在于海洋生物,、微生物和陸生生物中,。生物發(fā)光現(xiàn)象其實(shí)是在生物體內(nèi)由于生命過(guò)程中由化學(xué)反應(yīng)介導(dǎo)的將化學(xué)能轉(zhuǎn)化為光能所產(chǎn)生的，這其中起到主要作用的是一種叫熒光素酶的物質(zhì),。熒光素酶是自然界中能夠產(chǎn)生生物熒光的酶的統(tǒng)稱(chēng),，具代表性的是螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶，被廣泛應(yīng)用到生物學(xué)的報(bào)告基因中—一類(lèi)可以編碼熒光蛋白或酶,，從而將看不見(jiàn)的底物轉(zhuǎn)化為發(fā)光或彩色產(chǎn)物的一類(lèi)基因報(bào)告系統(tǒng),，光信號(hào)可通過(guò)發(fā)光檢測(cè)儀或CCD相機(jī)進(jìn)行檢測(cè)，是生物醫(yī)學(xué)領(lǐng)域基礎(chǔ)研究的一個(gè)重要工具,，廣泛應(yīng)用于檢測(cè)細(xì)胞的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和基因表達(dá),。
原理解析
螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶雖然同屬于熒光素酶，但是它們的來(lái)源及發(fā)光原理,、發(fā)光顏色、檢測(cè)波長(zhǎng)等都不盡相同,。
表1 兩種熒光素酶作用原理的區(qū)別
| 螢火蟲(chóng)熒光素酶 | 海腎熒光素酶 | |
| 來(lái)源 | 從螢火蟲(chóng)中分離得到 | 從海腎中分離得到 |
| 分子量 | 61 kDa | 36 kDa |
| 底物和輔因子 | 熒光素,、氧氣、ATP和鎂離子 | 腔腸素和氧氣 |
| 發(fā)光顏色 | 黃綠色 | 藍(lán)色 |
| 檢測(cè)波長(zhǎng) | 550-570nm | 480nm |
螢火蟲(chóng)熒光素酶發(fā)光原理：
海腎熒光素酶發(fā)光原理：
利用熒光素酶與底物結(jié)合發(fā)生化學(xué)發(fā)光反應(yīng)的特性,，可以把感興趣的基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控元件克隆在熒光素酶基因的上/下游,，構(gòu)建成熒光素酶報(bào)告質(zhì)粒。然后轉(zhuǎn)染細(xì)胞,，經(jīng)適當(dāng)刺激或處理后裂解細(xì)胞,，測(cè)定熒光素酶活性。通過(guò)熒光素酶活性的高低判斷刺激前后或不同刺激對(duì)感興趣的調(diào)控元件的影響,。
圖2 熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)流程圖
由于螢火蟲(chóng)熒光素酶和海腎熒光素酶的底物和發(fā)光顏色不同,，并且易于定量，檢測(cè)靈敏度高,，所以在雙報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)中得到廣泛應(yīng)用,。在雙熒光素酶報(bào)告基因檢測(cè)系統(tǒng)中螢火蟲(chóng)熒光素酶一般是作為主報(bào)告基因， 海腎熒光素酶通常作為內(nèi)參報(bào)告基因,，來(lái)標(biāo)定檢測(cè)用報(bào)告基因的測(cè)量結(jié)果,，從而達(dá)到有效地減少實(shí)驗(yàn)誤差的目的。
新品上市
| 產(chǎn)品名稱(chēng) | 貨號(hào) | 規(guī)格 |
| 雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 | abs60341 | 100/1000T |
| Firefly & Renilla Assay Kit |
愛(ài)必信雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒為檢測(cè)基因的表達(dá)量提供有效的手段,，在 DLR檢測(cè)中,，螢火蟲(chóng)螢光素酶（Firefly luciferase）和海腎螢光素酶（Renilla luciferase）的活性可在單個(gè)樣品中依次檢測(cè)。先以螢光素（Luciferin）為底物來(lái)檢測(cè)螢火蟲(chóng)螢光素酶的活性,，然后加入抑制螢火蟲(chóng)螢光素酶催化的物質(zhì),，同時(shí)加入腔腸素（Coelenterazine）檢測(cè)海腎螢光素酶的活性，實(shí)現(xiàn)雙螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè),。
產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)
兼容性好：本試劑盒的光信號(hào)可以兼容化學(xué)發(fā)光儀,、酶標(biāo)儀或液閃測(cè)定儀進(jìn)行測(cè)定,。
準(zhǔn)確性高：系統(tǒng)包含海腎熒光素，可校正孔間細(xì)胞數(shù)量,、轉(zhuǎn)染效率,、以及細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)造成的誤差，保證檢測(cè)結(jié)果的準(zhǔn)確性,。
抗干擾性強(qiáng)：無(wú)細(xì)胞內(nèi)源活性干擾,。
除以上介紹的雙熒光素酶報(bào)告試劑盒外我們提供多種熒光素酶檢測(cè)試劑盒、轉(zhuǎn)染試劑盒,，以滿(mǎn)足不同用戶(hù)的使用需求,。具體信息如下：
| 貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 |
| abs60342 | 螢火蟲(chóng)螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 | 50T/200T/1000T |
| abs60343 | 海腎螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 | 50T/200T/1000T |
| abs60344 | 一步法螢火蟲(chóng)螢光素酶報(bào)告基因檢測(cè)試劑盒 | 50T/200T/1000T |
| abs60252 | 小核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60253 | PM原代細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60254 | SP懸浮細(xì)胞小核酸轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60255 | 質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒（貼壁細(xì)胞） | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60256 | PM原代細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60257 | 溶液A（轉(zhuǎn)染增強(qiáng)劑，僅用于質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染） | 0.25ml/0.5ml/1ml |
| abs60258 | Elite Fect-I小核酸活體組織轉(zhuǎn)染試劑（小鼠轉(zhuǎn)染） | 3只/6只 |
| abs60259 | 核酸轉(zhuǎn)染試劑盒 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60317 | 核酸共轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60322 | Lipofect5000 質(zhì)粒轉(zhuǎn)染試劑 | 0.5ml/1.0ml |
| abs60324 | PM原代細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑盒 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60325 | SP懸浮細(xì)胞核酸轉(zhuǎn)染試劑盒 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
| abs60327 | SP懸浮細(xì)胞質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)染試劑盒 | 0.5ml/1.0ml/1.5ml |
關(guān)鍵詞：雙熒光素酶,；發(fā)光,；報(bào)告基因
上海優(yōu)寧維生物科技股份有限公司
試劑 | 耗材 | 儀器 | 軟件 | 定制 | 實(shí)驗(yàn)服務(wù) | 供應(yīng)鏈
微信公眾平臺(tái)：優(yōu)寧維抗體專(zhuān)家，歡迎關(guān)注,！
小優(yōu)博士（小程序）：5大課堂, 讓你的科研不再難,！
