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PI細胞周期可能有四種命運
閱讀：1178 發(fā)布時間：2022-10-22
PI細胞周期指細胞一個世代所經(jīng)歷的時間,。從一次細胞分裂結(jié)束到下一次分裂結(jié)束為一個周期,。細胞周期反應(yīng)了細胞增殖速度,。細胞周期是一個重要的檢測參數(shù)，研究細胞周期變化的影響對于腫瘤的發(fā)展及藥物研發(fā)有著重要的作用,。例如,，已知抑制有絲分裂的化合物大都用來減緩腫瘤細胞的生長。
PI細胞周期檢測步驟：
1.細胞樣品的準備：
收集細胞,，用1ml預(yù)冷PBS洗1遍,，輕輕彈擊離心管底以適當(dāng)分散細胞，避免細胞成團,。
2.細胞固定：
加入1ml預(yù)冷的70%乙醇中,，輕輕吹打混勻，4度固定2小時或更長時間(固定12-24小時可能效果更佳),。1000g離心3-5分鐘,，沉淀細胞(如果細胞沉淀不充分，可以適當(dāng)延長離心時間或加大離心力),。棄上清,，用用1ml預(yù)冷PBS洗1遍。
3.PI染色：
每個樣品用0.5ml染色緩沖液(或PBS)重懸,，加入25ulPI染色液(20×),、10ulRNaseA(50×)。37度避光溫浴30分鐘,。
4.流式檢測：
用流式細胞儀在激發(fā)波長488nm波長處檢測紅色熒光,，同時檢測光散射情況。采用分析軟件進行細胞DNA含量分析和光散射分析,。
PI細胞周期可能有四種命運：
?、偌毎?jīng)M期又開始第二次周期；
?、谕Ｖ褂贕2期,，稱為G2期細胞(R2)，它受某種刺激后可進入周期,；
?、弁Ｖ乖贕1期，稱為休止細胞或G0期細胞,，這類細胞受某種刺激后仍能進入周期,，繼續(xù)進行有絲分裂,；
④喪失生命力近于死亡的細胞,，稱為丟失細胞,，或稱不再分裂的細胞。繼續(xù)分裂的細胞沿著細胞周期從一個有絲分裂期到下一個分裂期,。不再分裂的細胞離開了細胞周期不再分裂,，終死亡。