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1.色譜柱信息
Inertsil C8-3液相色譜柱是在高純度球狀硅膠基質(zhì)上鍵合十八烷基的反相分離模式色譜柱,,適合用于弱極性至中等極性例如合成藥物、中藥,、多肽,、有機(jī)酸等的分離。Inertsil C8-3液相色譜柱從硅膠基質(zhì)的合成,,到化學(xué)處理和裝填后的性能檢測(cè),,都是在本公司嚴(yán)格的產(chǎn)品控制下進(jìn)行,因此不同批次的柱與柱之間具有優(yōu)異的重現(xiàn)性;通過獨(dú)有的裝填技術(shù)填裝的C8-3柱柱床密度均一穩(wěn)定,,從而確保色譜柱具有高柱效,,硅膠粒徑分布均勻,確保柱壓極低,。C8-3 液相色譜柱具有優(yōu)異的選擇性,,保留能力較強(qiáng),端基封尾徹底,,即使是酸性和堿性化合物分析,,也能保持良好的峰型。
為了能長(zhǎng)期保持Inertsil C8-3液相色譜柱的優(yōu)越性能和正確的使用色譜柱,,在使用色譜柱之前請(qǐng)仔細(xì)閱讀本說明書,。
2.使用前的檢查與須知事項(xiàng)
●檢查包裝箱的外觀有無(wú)異常。
●打開包裝,檢查色譜柱的填料名稱,、尺寸規(guī)格,、連接型式是否相符。
●色譜柱中封存流動(dòng)相為乙腈/水或者甲醇/水的混合物,,具體比例請(qǐng)參考柱效報(bào)告,。
3.色譜柱填料規(guī)格
4.色譜柱安裝與操作
色譜柱在運(yùn)輸過程中,兩端用堵頭密封,。當(dāng)將色譜柱接入色譜儀器系統(tǒng)時(shí),,首先請(qǐng)確保系統(tǒng)中的溶劑和液相柱中封存溶劑是互溶的。如果不能互溶,,請(qǐng)采用一種能夠與系統(tǒng)及色譜柱都能互溶的溶劑對(duì)系統(tǒng)進(jìn)行充分過渡之后再將色譜柱連接到系統(tǒng)中,,并注意流動(dòng)相的方向要與柱上標(biāo)記的方向保持一致。我公司提供的常規(guī)液相色譜柱標(biāo)準(zhǔn)接頭型式為1/16英寸Waters接頭螺絲型(如下左圖),,同時(shí)還有耐高壓液相系統(tǒng)的UP型(如下右圖),,如果需要其他接頭型式請(qǐng)另行咨詢。
色譜柱連接好之后,,請(qǐng)確認(rèn)無(wú)漏液現(xiàn)象之后再進(jìn)行后續(xù)操作,。
新的C8-3柱是保存在乙腈/水或者甲醇/水的混合溶液中,,在儲(chǔ)存和運(yùn)輸過程中,,硅膠填料可能會(huì)干涸,推薦用純的甲醇或乙腈沖洗10~20倍柱體積對(duì)色譜柱進(jìn)行活化,,流速?gòu)?/span>0.1mL/min緩慢上升到最佳流速,。(如果在活化過程中即發(fā)現(xiàn)壓力和基線不正常時(shí),請(qǐng)及時(shí)聯(lián)系我公司工程師及時(shí)處理,。)然后再用不含緩沖鹽的流動(dòng)相進(jìn)行平衡20倍柱體積,,再用流動(dòng)相平衡,待壓力和基線穩(wěn)定之后,,再進(jìn)樣分析,。
5.樣品與流動(dòng)相
為避免色譜柱堵塞,所有樣品及溶劑,,包括緩沖溶液在內(nèi),,在使用前必須用0.45 μm或者0.22 μm的濾膜過濾。
6.色譜柱的保養(yǎng)
●pH Inertsil C8-3色譜柱可在pH2~7.5范圍內(nèi)使用,,為保持色譜柱良好的壽命,,請(qǐng)避免較強(qiáng)的酸或堿性樣品或者流動(dòng)相進(jìn)入色譜柱。
●耐壓常規(guī)色譜柱耐受壓力為20MPa,,HP系列耐壓為50MPa,,UHPLC系列耐受80MPa,但是正常的壓力建議控制在耐受壓力的2/3以下。長(zhǎng)時(shí)間在高壓下運(yùn)行會(huì)對(duì)色譜柱造成難以修復(fù)的損害,,因此系統(tǒng)壓力升高之后,,建議盡快排查系統(tǒng),如果是色譜柱壓力升高,,請(qǐng)及時(shí)采用適當(dāng)溶劑沖洗色譜柱,。
●溫度最高操作溫度為60℃,長(zhǎng)時(shí)間在高溫下操作會(huì)顯著降低色譜柱壽命,。
●沖洗
1.新柱平衡:新柱是保存在高比例的有機(jī)溶劑中,,建議先采用色譜柱保存流動(dòng)相平衡色譜柱一段時(shí)間,觀察基線和壓力是否正常,,然后再通入流動(dòng)相,。
如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑,直接用流動(dòng)相平衡即可;如果流動(dòng)相使用緩沖鹽,,先要用高比例的水相充分過渡20倍柱體積,,然后進(jìn)行流動(dòng)相平衡。
2.使用完畢后的清洗,、保存及再使用時(shí)流動(dòng)相的過渡:
①使用完畢后,,先用高比例的水相進(jìn)行沖洗約20倍柱體積。
②如果流動(dòng)相中不使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑,,上述①完畢后,,用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積,然后此條件下進(jìn)行保存,,再使用時(shí)直接沖流動(dòng)相即可,。
③如果流動(dòng)相中使用緩沖鹽或離子對(duì)試劑,上述①完畢后,,用100%的有機(jī)溶劑沖洗約20倍柱體積,,然后此條件下進(jìn)行保存,再使用時(shí)請(qǐng)務(wù)必用高比例的水相充分過渡20倍柱體積,,再通入流動(dòng)相,。
●儲(chǔ)存色譜柱長(zhǎng)期不用,建議日常沖洗方法完成之后,,再用純乙腈或者甲醇沖洗20倍柱體積,,然后保存在該流動(dòng)相條件下,之后卸掉色譜柱,,兩端用堵頭密封,,并放在溫度變化小的場(chǎng)所。
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