leuk1口腔上皮細胞

操作步驟：

收到細胞后，在倒置鏡下(zui好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況,。

（一）如果細胞未長滿,，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作,，打開細胞培養(yǎng)瓶,，吸出培養(yǎng)液，換8-10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。

(二)如果細胞已長滿,，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：

1. 棄去培養(yǎng)液,，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次,。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓,，迅速拿回操作臺,，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。

3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出一半,，分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,，收到細胞后的*傳代一般是一傳二,。