hct116/L人結(jié)腸癌耐奧沙利鉑細胞細胞株
特性:
安全性:所有腫瘤和病毒轉(zhuǎn)染的細胞均視為有潛在的生物危害性,,必須在二級生物安全臺內(nèi)操作,并請注意防護,,所有廢液及接觸過此細胞的器皿需高壓滅菌后方能丟棄,。收到細胞后,,在倒置鏡下zui好是在4X物鏡)觀察整個細胞生長情況。
(一)如果細胞未長滿,,用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi),,嚴格無菌操作,打開細胞培養(yǎng)瓶,,吸出培養(yǎng)液,,換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。
(二)如果細胞已長滿,,即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟操作如下:
1. 棄去培養(yǎng)液,,用PBS(不含鈣,鎂離子)洗1-2次,。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,,之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,,在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓,,迅速拿回操作臺,,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3. 按6-8ml/瓶補加*培養(yǎng)基,,輕輕打勻后吸出一半,,分到新的培養(yǎng)瓶中。如果沒有特別說明,,收到細胞后的*次傳代一般是一傳二,。
人 注意事項:
1、觀察細胞在低倍鏡(4或5X物鏡)下進行,,否則不能準確判斷細胞的傳代密度,。看細胞的形態(tài)請在10X或20X物鏡下,。
2,、瓶中運輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請換用加雙抗的新培養(yǎng)基,細胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。
3,、有些細胞貼壁不牢,如發(fā)現(xiàn)貼壁細胞有脫落,,可離心吹打后接種到新瓶內(nèi),。
4、收到細胞后,,若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細胞有污染,,請及時與我們。
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