A2780/Taxol-LUC人卵巢癌紫杉醇耐藥株-熒光素酶標(biāo)記操作步驟：
請(qǐng)收到細(xì)胞后,，在倒置鏡下(是在4X物鏡)觀察整個(gè)細(xì)胞生長(zhǎng)情況,。
（一）如果細(xì)胞未長(zhǎng)滿，用75%酒精噴灑整個(gè)瓶消毒后放到超菌臺(tái)內(nèi),，嚴(yán)格無菌操作,，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液,，換 10ml新鮮培養(yǎng)液后繼續(xù)培養(yǎng),。
（二） (二)如果細(xì)胞已長(zhǎng)滿，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng),。具體步驟如下：
1.棄去培養(yǎng)液,，用PBS（不含鈣,鎂離子）洗1-2次。
2.加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中,，倒放于37℃培養(yǎng)箱1-3分鐘預(yù)熱,，之后翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶10-30秒后,，在倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓,，迅速拿回操作臺(tái),，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量*培養(yǎng)基終止消化。
3.按6-8ml/瓶補(bǔ)加*培養(yǎng)基,，輕輕打勻后吸出一半,，分到新的培養(yǎng)瓶中。
如果沒有特別說明,，收到細(xì)胞后的*次傳代一般是一傳二,。
注：1、觀察細(xì)胞在低倍鏡（4或5X物鏡)下進(jìn)行,，否則不能準(zhǔn)確判斷細(xì)胞的傳代密度,。看細(xì)胞的形態(tài)請(qǐng)?jiān)?0X或20X物鏡下,。2,、瓶中運(yùn)輸培養(yǎng)基不能重復(fù)再用,請(qǐng)換用加雙抗的新培養(yǎng)基，細(xì)胞凍存后,培養(yǎng)基中可不加任何抗生素,。3,、有些細(xì)胞貼壁不牢，如發(fā)現(xiàn)貼壁細(xì)胞有脫落,，可離心吹打后接種到新瓶?jī)?nèi),。4、收到細(xì)胞后,，若發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)瓶破損,、有液溢出及細(xì)胞有污染，請(qǐng)及時(shí)與我們,。

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