線粒體膜電位檢測
服務介紹:
線粒體膜電位檢測試劑盒(JC-1)是一種以JC-1 為熒光探針,,快速靈敏地檢測細胞,、組織或純化的線粒體膜電位變化的試劑盒,可以用于早期的細胞凋亡檢測,。
服務目的:
通過檢測線粒體膜電位變化鑒定樣品的凋亡情況
服務原理:
JC-1為陽離子脂質熒光染料,,有單體和多聚體兩種存在狀態(tài),兩者的發(fā)射光譜不同,。正常健康線粒體的膜電位(△y)具有極性,,JC-1依賴于△y的極性被迅速攝入線粒體內,并因濃度增高而在線粒體內形成多聚體,,多聚體發(fā)射光為紅色熒光,;而細胞發(fā)生凋亡時,線粒體跨膜電位被去極化,,JC-1從線粒體內釋放,,紅光強度減弱,以單體的形式存在于胞質內,,發(fā)綠色熒光,。
服務流程:
1、細胞重懸于0.5mL 細胞培養(yǎng)液中,,細胞培養(yǎng)液中可以含血清和酚紅,。;
2,、用適當的方法誘導細胞凋亡,,同時設立陰性依照組合陽性對照組,收集細胞,;
3,、用PBS洗滌細胞三次,收集不多于1×106的細胞;
4,、加入0.5mL JC-1 染色工作液,,顛倒數次混勻。細胞培養(yǎng)箱中37℃孵育20 分鐘,。
5,、在孵育期間,按照每1mL JC-1 染色緩沖液(5×)加入4mL 蒸餾水的比例,,配制適量的JC-1 染色緩沖液(1×),,并放置于冰浴。
6,、37℃孵育結束后,,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,。棄上清,,注意盡量不要吸除細胞。
7,、用JC-1 染色緩沖液(1×)洗滌2 次:加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細 胞,,600g 4℃離心3~4 分鐘,沉淀細胞,,棄上清,。再加入1mL JC-1 染色緩沖液(1×)重懸細胞,600g4℃離心3~4 分鐘,,沉淀細胞,,棄上清。
8,、再用適量JC-1 染色緩沖液(1×)重懸后,,用流式細胞儀分析。
服務說明:
1,、檢測細胞株(若實驗室有,,可共享)。
2,、待測毒性藥物(根據實驗方案有無),。
3、實驗設計方案或參考文獻,。
4,、若另有疑問歡迎向本公司咨詢,我們將竭誠為您服務,。
收費標準/服務周期/提供結果:
詳談,,我們會根據您的方案及需求制定詳細的服務協(xié)議,。
【本公司合作項目】
慢病毒,腺病毒,,RNAi類,,分子生物實驗,病理實驗,,免疫學實驗,,細胞實驗,動物實驗,,蛋白組學實驗等,能夠進行藥效學評價,、毒理學評價,、細胞藥篩、動物建模,、病理檢測,、蛋白組學、代謝組學,、高通量測序,、ChIP、CO-IP,、生物信息學分析服務,!
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線粒體膜電位檢測(JC-1)/膜電位檢測
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