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生物顯微鏡的使用與保養(yǎng)

閱讀:3243      發(fā)布時間:2019-2-19
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  一,、生物顯微鏡的使用

  (一)使用環(huán)境與工作習慣

  1、使用環(huán)境

  顯微鏡的工作場所應當清潔,、干燥,、無震動、無腐蝕性氣體存在。

  2,、工作習慣

  (1)臺面和凳子的高度要適當,。

  (2)鏡檢時,即便用單目顯微鏡,,也須兩眼同時睜開,,用左眼觀察。以便右眼繪圖或記錄,。如一只眼睜,,一只眼閉,眼睛容易疲勞,,無法久看,。工作時間較長時,可兩眼輪流觀察,。

  (二)使用前的準備

  1,、光學系統(tǒng)的安裝

  對新購或已經卸掉光學系統(tǒng)的顯微鏡,使用前必須先將顯微鏡安裝起來,。安裝時,,為了防止向下掉灰塵,應按照先上后下的順序,,即按照目鏡,、物鏡、聚光鏡,、反射鏡的順序來安裝,。圖10-3-1為顯微鏡的安裝圖。箭頭所示為光學元件的安裝位置,。

  安裝物鏡時,應先將鏡筒升高或載波物臺下降,,使轉換器與載物臺之間保持一定的距離,。握往物鏡,把它放入轉換器的螺絲口處,,先略向反時針方向旋轉,,待物鏡配上絲紋后,再按順時針方向旋入,,旋至中等程度松緊即可,。安裝物鏡時,應根據物鏡的放大倍數,,從小到大順時針安裝,。轉換物鏡時,不要用手推著物鏡旋轉,,那樣會使物鏡的光軸歪斜,。用手捏著轉換器的轉動盤旋轉,,或用手扶著與物鏡轉換器銜接處的滾花外圓旋轉。

  目鏡和物鏡裝好后,,再將聚光鏡插入載物臺下面的聚光器支架內,。插入的高度應使聚光器升至高時,聚光鏡上透鏡的端面稍低于載物臺的平面,,以免載玻片與聚光器的鏡頭相碰,。然后,將聚光器的固定螺絲旋緊,。對非電光源的顯微鏡來說,,后要把反射鏡插入聚光器下面的插孔內。

  2,、校正光軸

  校正光軸的意義在于使物鏡,、目鏡,、聚光鏡的主光軸和可變光欄的中心點重合在一條直線上,。所以又叫做合軸調節(jié)或中心調節(jié)。如果光軸歪斜,,會使像差增大,,分辨率和清晰度都要下降,。

  檢查方法是將可變光欄開至大,把低倍物鏡旋入光軸,,降低鏡筒,,使物鏡與載物臺之間的距離小于該物鏡的工作距離(5mm以下)。不放標本,,調節(jié)反射鏡的角度,,使視場亮;或調節(jié)光源燈的亮度,使視場明暗合適,。

  然后,,拔掉目鏡,直接從鏡筒中觀察,。一邊把可變光欄慢慢縮小或打開數次,,當光欄關至小時,光欄的像(此時只有一點點)應正好落在物鏡通光孔的中心,。當光欄開大到一定程度時,,光欄孔的像應正好與物鏡通光孔的黑圈相重合。若符合上述兩個條件,,說明它們“合軸”,。否則,就需要調整。

  目鏡和物鏡都是固定的,,無法進行調整,。合軸調節(jié)主要是調整聚光鏡的位置。有些顯微鏡聚光器支架兩旁有兩個光軸校正螺絲,,調節(jié)這兩個螺絲,,即可合軸。另一種聚光器是由框架上三個相隔120°的螺絲支持住,,其中一個裝有彈簧,,可以伸縮;另外兩個螺絲,可以旋動,。調整這兩個螺絲,,便可合軸。

  顯微鏡的光軸校正好后,,如果沒有拆下聚光器或其它特殊原因,,不必經常校正。

  3,、準備好標本

  準備好高質量的標本備用,。

  (三)反射鏡、聚光器的使用方法和對光方法1,、調光

  對采用反射鏡的的顯微鏡,,一般都使用平面反射鏡去反射太陽的散射光。只有在光線不足或窗外有干擾時,,才使用凹面反射鏡,。

  采用電光源的顯微鏡,將光亮調合適即行,。

  2,、聚光器的用法

  (1)聚光器高度的調節(jié) 一般的聚光鏡,在平行光照射的情況下,,其焦點落在它上端透鏡平面中心上方約1.25mm處,。當使用高倍鏡或油鏡時,由于放大率大,,鏡像亮度小,需要較強的照明,。因此,,應把聚光器升至高,以便使聚光鏡的焦點正好落在標本平面上,。但在使用低倍物鏡時,,可將聚光器適當下降。

  (2)可變光欄的用法 可變光欄起兩個作用。一是控制射向標本的光通量;二是改變聚光器的數值孔徑,。在這兩個作用中,,后者是主要的。為了使物鏡的分辨率得到充分的利用,,從原則上說,,聚光器的數值孔徑應與物鏡的相同。否則,,分辨率或清晰度會受影響,。

  3、對光方法

  對電光源顯微鏡來說,,使用時,,只要將光調節(jié)在合適的亮度即行。不需要進行對光,。但對使用自然光的低檔顯微鏡來說,,要想獲得良好的觀察效果,必須充分利用照明光線,。因此,,鏡檢之前應先對光。對光時,,將低倍鏡旋入光軸,,聚光器適當升高,可變光欄開至大,。然后,,從目鏡中觀察,同時轉動反射鏡,,直至視場明亮,、清晰為止。如果利用自然光,,則盡量躲避窗框和窗外樹枝的干擾,。

  (四)物鏡的正確調焦

  對光完成后或調節(jié)合適光亮后,升高鏡筒或降低載物臺,,將標本玻片夾在移動器即標本夾上,,并將欲檢查的部分移至載物臺通光孔的中央,然后開始調焦,。

  無論作何種檢查,,均應從低倍鏡開始。調焦時,,先用粗動手輪將鏡筒下降,,使低倍鏡的前透鏡與蓋玻片之間的距離略小于該物鏡的工作距離(5mm以下),。為了避免物鏡壓在標本玻片上,可從側面窺視,。然后,,一邊從目鏡中觀察視野,一邊利用粗動手輪將鏡筒徐徐上升,,待初見物像后,,改用微動手輪作精細調焦,直至物像清晰為至,。低倍物鏡的視場大,,有利于觀察標本的全貌。也可利用移動器或縱,、橫向調節(jié)手輪尋覓所觀察的目標,。如有必要,可將尋得的目標移至視場的中心,,為高倍鏡觀察作好準備,。

  從低倍物鏡轉換為高倍物鏡時,如果物鏡是顯微鏡的原配,,所用的載玻片,、蓋玻片又符合標準,一般都可以進行“等高轉換”,。即轉換后,,只要稍微調節(jié)一下微調旋鈕,即可看到清晰的圖像,。但油鏡不強求齊焦,,先將鏡筒升高后再轉換,后按低倍鏡的調焦方法重新調焦,。

  使用油鏡的方法如下:先將鏡筒升高,,取下標本玻片,稍稍降低聚光器,,并在聚光器的鏡頭上滴兩滴香柏油(油中不應有氣泡,。如有,可用小木簽除去),,再將標本玻片放回原處,,把聚光器升高,使載玻片的底面與香柏油接觸,。這樣,,就完成了聚光鏡的油浸。接著,,在蓋玻片上滴上1滴香柏油,。然后從側面窺視,利用粗調使鏡筒盡量下降,,直至油鏡的前透鏡浸沒在香柏油中(但尚未接觸玻片),,這樣,又完成了物鏡的油浸,。然后,,一邊從目鏡中觀察,一邊利用微動手輪將鏡筒緩緩上升(注意不要擰錯了方向,,壓碎蓋玻片),,直至視野中出現(xiàn)清晰的物像為止。

  聚光鏡的油浸,,還可以采用另一種滴油方法:即不直接把油滴在聚光器的鏡頭上,,而是把載玻片翻過來,將油滴在載玻片的底面上,,然后再翻過去,,對準放置于聚光器上面,再使聚光器上升,,來完成聚光器的油浸,。這種方法雖然不那么順手,但比較安全,。有些人使用玻璃棒直接與聚光鏡接觸來涂抹香柏油,,這種方法容易劃傷鏡片,不宜采用,。

  在使用油鏡時,,允許在聚光鏡與標本之間不加香柏油,即聚光鏡上仍以空氣為介質,,但這會犧牲物鏡的分辨率,。

  如用油鏡觀察后,如又需要轉回高倍物鏡觀察,,應將蓋玻片上的油擦去,,以免沾污高倍物鏡。但聚光器上的油可以不擦,,只要把光欄適當縮小一點即可,。

  油鏡使用完畢后,要及時將香柏油擦拭干凈,。鏡頭上可先用干凈的擦鏡紙擦1~2次,,把大部分的油擦掉。然后用二甲苯滴濕的擦鏡紙擦兩次,,后用擦鏡紙擦干凈即行,。聚光鏡的擦拭方法與此相同,。如標本需要保存,玻片上的香柏油可用“拉紙法”擦拭干凈,。即將擦鏡紙復蓋在玻片上,,在紙上滴上一滴二甲苯,趁濕將紙條平拖著往外拉,,連續(xù)幾次即可擦干凈,。

 

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