2011年蒙牛黃曲霉素事件讓黃曲霉素走進了大眾的視野,，黃曲霉毒素(AFT)是迄今發(fā)現(xiàn)的霉菌毒素中毒性大、對人類健康危害極為突出的一類霉菌毒素,，有AFB1,、AFB2、AFG1,、AFG2等多種形式,它們存在于土壤,、動植物、各種堅果中,，特別是容易污染花生、玉米,、稻米,、大豆、小麥等糧油產(chǎn)品,，對人和動物有強烈的毒性,。
黃曲霉素檢測初以薄層層析法為主，發(fā)展到液相色譜法,、微柱法,、酶聯(lián)免疫吸附法等多種方法普遍應用，其進展與新的化學檢測手段和新儀器的出現(xiàn)密不可分,。這些新方法,、新手段的快速應用，為黃曲霉毒素的檢測提供了更廣泛的選擇余地,，適應了不同的檢測目的和要求,。
薄層分析法(TLC)
TLC法是檢測黃曲霉素為經(jīng)典的方法，也是以前為常用的方法,，至今仍為一些檢測機構所用,，也是一種國標方法。其原理是針對不同的試樣,，用適宜的萃取溶劑將黃曲霉素從試樣中萃取出來,，經(jīng)柱層析凈化后,，再在薄板上展開后分離。利用黃曲霉素的熒光特性,，根據(jù)熒光斑點的強弱與標準比較確定其含量,，對于一些組分很復雜的試樣要雙向展開，才能獲得較高的靈敏度,。
TLC法設備簡單,，檢測費用低，但操作繁瑣,、費時,，萃取和凈化效果不理想，靈敏度差,，對操作人員的身體健康存在較大程度的危害,。
液相色譜法(HPLC)
液相色譜法是20世紀80年代發(fā)展起來的檢測黃曲霉毒素的方法，主要是用熒光檢測器檢測,，這一檢測方法將化學分析與計算機技術相結合,，使自動化程度得到極大提高，在實驗空間,、人力和儀器都保持不變的情況下,，能檢測更多的樣品。其原理是根據(jù)衍生后的黃曲霉毒素在固定相和流動相之間的分配量不同,，從而達到分離的目的,，分離后的黃曲霉毒素能發(fā)射特征性熒光，被熒光檢測器捕獲后得到檢測,。該方法既可采用正相色譜也可采用反相色譜,。正相色譜中固定相一般使用硅膠柱，流動相使用以50%水飽和的三氯甲烷：環(huán)己烷：乙腈：乙醇,。反相色譜固定相為C18,，流動相為乙酸：乙腈：異丙醇：水(1∶5∶5∶39)。
該法能準確地分離不同種類的黃曲霉素(例如：AFB1,、AFB2,、AFG1和AFM1等)，檢測速度快且定性與定量準確,，檢測限低,，可作為仲裁法使用，但儀器設備價格昂貴,，前處理方法相對繁瑣,，若用到免疫親和柱則會使試樣檢測費用增加，對操作人員的身體健康仍存在一定的危害,。
酶聯(lián)免疫法(ELISA)
ELISA法也是近年來研究開發(fā)出來的一種較為新穎的方法,。ELISA 法測定黃曲霉毒素時主要采用間接競爭酶聯(lián)免疫吸附法,，原理是將黃曲霉毒素的特異性抗體包被于聚苯乙烯微量反應板的孔穴中，再加入待測樣品及酶標已知抗原,，兩者與特異性抗體進行免疫競爭反應,，然后加入酶底物顯色，利用酶標儀根據(jù)顯色反應顏色的深淺進行定量,。
該方法測定結果準確可靠,，操作簡便，所涉及儀器及試劑比較少,，回收率高,，實驗步驟也比較簡單，是目前國內外較為先進的黃曲霉毒素檢測方法,。但抗體壽命短且需要低溫保存,，測定時假陽性率比較高，適合于大量樣品的篩查,。
微柱篩選法
微柱篩選法是將樣品提取液通過由氧化鎂和硅鎂吸附劑組成的微柱層析管,，雜質被氧化鋁吸附，黃曲霉素被硅鎂吸附劑吸附,，在365紫外線下呈藍紫色熒光,，其熒光強度在一定范圍內與黃曲霉素的含量成正比，由于微柱不能分離AFB1,、AFB2,、AFG1、AFG2,，故檢測結果為黃曲霉素總量。
微柱法篩選黃曲霉素主要是用來檢驗黃曲霉素是否存在以及快速篩選出超樣品,。因此,，微柱篩選法不能完成黃曲霉素篩選的整個過程，僅僅用于定性檢驗,。
金標試紙法
金標試紙法,，實際就是一種固相免疫分析法。其原理是利用抗體與抗原的特異性結合反應,，可一步檢測黃曲霉素,。
該法可在5～10 min內完成對試樣中黃曲霉素的定性測定，具有簡單,、快速的特點,，且無須其他儀器設備的配合，既可在實驗室中進行檢測,，也可在現(xiàn)場進行實地測定,，但是其檢測的準確度,、精度有待進一步的研究。
生物傳感器法
生物傳感器是使用固定化技術將具有分子識別能力的生物活性物質與物理化學換能器結合,，可以用來探測生物體內外的環(huán)境化學物質或與之起特異性交互作用后產(chǎn)生響應的一種裝置,。其中利用分子間特異親和性制備的親和型生物傳感器為免疫傳感器口。根據(jù)能量轉換器所傳導的物理或化學信號的不同,，免疫傳感器又可分為電化學免疫傳感器,、光學免疫傳感器、壓電晶體免疫傳感器等,。
由于生物傳感器具有選擇性高,、響應快、操作簡單,、攜帶方便和適合于現(xiàn)場檢測等優(yōu)點,，因此各國科研工作者正積極探索研制新型生物傳感器用于檢測黃曲霉素。
13
立即詢價
您提交后,，專屬客服將第一時間為您服務