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　　流式細(xì)胞儀是進(jìn)行流式細(xì)胞分析的儀器,，集電子,、計算機(jī)、激光,、流體理論于一體,，被譽(yù)為試驗室的“CT”。

　　流式細(xì)胞術(shù)(Flow CytoMeter, FCM)是一種在功能水平上對單細(xì)胞或其他生物粒子進(jìn)行定量分析和分選的檢測手段,，它可高速分析上萬個細(xì)胞,，并能同時從一個細(xì)胞中測得多個參數(shù)，與傳統(tǒng)熒光鏡檢查相比,，具有速度快,、精度高、準(zhǔn)確性好等優(yōu)點(diǎn),，成為當(dāng)代的細(xì)胞定量分析技術(shù),。

　　工作原理

　　將待測細(xì)胞染色后制成單細(xì)胞懸液。用一定壓力將待測樣品壓入流動室,，不含細(xì)胞的磷酸緩沖液在高壓下從鞘液管噴出,，鞘液管入口方向與待測樣品流成一定角度，這樣,，鞘液就能夠包繞著樣品高速流動,，組成一個圓形的流束，待測細(xì)胞在鞘液的包被下單行排列,，依次通過檢測區(qū)域,。

　　流式細(xì)胞儀通常以激光作為發(fā)光源。經(jīng)過聚焦整形后的光束,，垂直照射在樣品流上,，被熒光染色的細(xì)胞在激光束的照射下,，產(chǎn)生散射光和激發(fā)熒光。這兩種信號同時被前向光電二極管和90°方向的光電倍增管接收,。光散射信號在前向小角度進(jìn)行檢測,，這種信號基本上反映了細(xì)胞體積的大小;熒光信號的接受方向與激光束垂直，經(jīng)過一系列雙色性反射鏡和帶通濾光片的分離,，形成多個不同波長的熒光信號,。

　　這些熒光信號的強(qiáng)度代表了所測細(xì)胞膜表面抗原的強(qiáng)度或其核內(nèi)物質(zhì)的濃度，經(jīng)光電倍增管接收后可轉(zhuǎn)換為電信號,，再通過A/D轉(zhuǎn)換器,，將連續(xù)的電信號轉(zhuǎn)換為可被計算機(jī)識別的數(shù)字信號。計算機(jī)把所測量到的各種信號進(jìn)行計算機(jī)處理,，將分析結(jié)果顯示在計算機(jī)屏幕上,，液可以打印出來，還可以數(shù)據(jù)文件的形式存儲在硬盤上以備日后的查詢或進(jìn)一步分析,。

　　檢測數(shù)據(jù)的顯示視測量參數(shù)的不同由多種形式可供選擇,。單參數(shù)數(shù)據(jù)以直方圖的形式表達(dá)，其X軸為測量強(qiáng)度,，Y軸為細(xì)胞數(shù)目,。一般來說，流式細(xì)胞儀坐標(biāo)軸的分辨率有512或1024通道數(shù),，這視其模數(shù)轉(zhuǎn)換器的分辨率而定,。對于雙參數(shù)或多參數(shù)數(shù)據(jù)，既可以單獨(dú)顯示每個參數(shù)的直方圖,，也可以選擇二維的三點(diǎn)圖,、等高線圖、灰度圖或三維立體視圖,。

　　細(xì)胞的分選是通過分離含有單細(xì)胞的液滴而實現(xiàn)的,。在流動室的噴口上配有一個超高頻電晶體，充電后振動,，使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,，待測定細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正負(fù)不同的電荷,，當(dāng)液滴流經(jīng)帶有幾千伏特的偏轉(zhuǎn)板時,，在高壓電場的作用下偏轉(zhuǎn)，落入各自的收集容器中,，不予充電的液滴落入中間的廢液容器,，從而實現(xiàn)細(xì)胞的分離。

　　應(yīng)用范圍

　　用于白血病的分型、腫瘤細(xì)胞染色體的異倍性測定,，以及免疫學(xué)研究,，并已開始用于細(xì)菌鑒定，病毒感染細(xì)胞的識別和愛滋病感染者T4,、T8細(xì)胞的記數(shù),。

　　70年代以來，隨著流式細(xì)胞技術(shù)水平的不斷提高,，其應(yīng)用范圍也日益廣泛,。流式細(xì)胞術(shù)已普遍應(yīng)用于免疫學(xué)、血液學(xué),、腫瘤學(xué),、細(xì)胞生物學(xué),、細(xì)胞遺傳學(xué),、生物化學(xué)等臨床醫(yī)學(xué)和基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)研究領(lǐng)域。

　　技術(shù)特點(diǎn)

　　流式細(xì)胞儀作為一種先進(jìn)的細(xì)胞定量分析檢測儀器,，設(shè)計上采用了許多*的技術(shù),，其中涉及到液流系統(tǒng)、光路系統(tǒng),、信號測量和細(xì)胞分選等4個方面,。

　　展望

　　流式細(xì)胞儀從細(xì)胞技術(shù)開始發(fā)展到今天，60至70年代是其飛速發(fā)展時期,，激光技術(shù),、噴射技術(shù)以及計算機(jī)的應(yīng)用使流式細(xì)胞儀在原理和結(jié)構(gòu)上形成了固定的模式。

　　80年代則是流式細(xì)胞儀的商品化時期,，這期間不斷有新型號的儀器推出,，在多參數(shù)檢測技術(shù)上不斷提高。

　　進(jìn)入90年代,，隨著微電子技術(shù)特別是計算機(jī)技術(shù)的發(fā)展,，流式細(xì)胞儀的功能也越來越強(qiáng)大。在數(shù)據(jù)管理,、數(shù)據(jù)分析方面有了長足進(jìn)步,。但是，在技術(shù)原理和設(shè)計方面并沒有突破性的進(jìn)展,。人們的注意力開始轉(zhuǎn)向流式細(xì)胞儀的應(yīng)用,，新的熒光探針、新的熒光染料,、新的染色方法不斷推出,，使流式細(xì)胞技術(shù)在新的細(xì)胞參數(shù)分析方面日益發(fā)展。

　　從新推出的儀器看，流式細(xì)胞儀會在硬件上不斷更新,，采用更新的器件(如半導(dǎo)體激光,、大規(guī)模集成電路)，以實現(xiàn)小型化;用數(shù)字電路取代模擬電路,，充分發(fā)揮微處理器的功能以實現(xiàn)簡單化;在軟件上提高數(shù)據(jù)自動分析能力,，充分發(fā)揮圖形界面的優(yōu)點(diǎn)，使操作更加簡便,。