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    一,、多功能凈化柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法

　　1 簡(jiǎn)介

　　多功能凈化柱是由多種固相復(fù)合填料不僅包括大分子物質(zhì),，更重要的是含有多種活性親脂性(非極性)和帶電(極性)物質(zhì)，用來(lái)吸附各種酯類,，葉黃素,，化學(xué)物質(zhì),，碳水化合物和蛋白質(zhì)等干擾物。多功能凈化柱+KRC衍生法就是利用PRIBOLAB公司的Pribofast 226/260多功能凈化柱可以將Aflatoxins B1,、B2,、G1、G2很好的分離出來(lái),，然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測(cè)定Aflatoxins B1,、B2、G1,、G2含量,。

　　2 多功能凈化柱特點(diǎn)：

　　2.1 多功能凈化柱可以簡(jiǎn)化樣品提取、凈化步驟,，無(wú)需清洗和洗提,。

　　2.2 可以實(shí)現(xiàn)多種毒素檢測(cè)，有效降低檢測(cè)成本;

　　2.3 HPLC+FLD+KRC衍生化,，可以有效提高檢測(cè)靈敏度,，實(shí)現(xiàn)較低的檢測(cè)限(Aflatoxins B1 0.05ppb);

　　2.4 光化學(xué)衍生操作簡(jiǎn)便，無(wú)需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,，分析成本高,，操作麻煩，儀器故障率較高);

　　2.5 一步法凈化,，回收率高達(dá)90%左右,。

　　2.6 廣泛適用于各類農(nóng)產(chǎn)品：谷物、淀粉,、動(dòng)物飼料,、食品、堅(jiān)果,、棉籽等,。

　　3 多功能凈化柱/KRC衍生法操作步驟簡(jiǎn)介：

　　3.1 提取樣品：研磨粉碎、稱重25g樣品;用乙腈/水(84/16 V/V)混合樣品,，

　　高速均質(zhì) 1 分鐘,。

　　3.2 過(guò)濾：將提取的樣品定量濾紙過(guò)濾,，收集濾液;

　　3.3 取4-6ml濾液快速通過(guò) 多功能凈化柱PribofastM226 或Pribofast M260

　　3.4 收集過(guò)柱溶液,，直接用于HPLC檢測(cè)，KRC衍生化后直接記錄Aflatoxins 濃度,。

　　二,、免疫親和柱+KRC光化學(xué)柱后衍生法

　　1 簡(jiǎn)介

　　PribofastAflatoxins 總量免疫親和柱可選擇性吸附樣品液中的毒素，從而對(duì)毒素樣品起到非常針對(duì)性的純化作用,，然后用HPLC/FLD+KRC柱后衍生系統(tǒng)可以有效的測(cè)定Aflatoxins  B1,、B2,、G1、G2濃度,，提高檢測(cè)的準(zhǔn)確性和靈敏度,。

　　2 免疫親和柱/KRC衍生法特點(diǎn)：

　　2.1 特異性很強(qiáng)使得樣品凈化效果;

　　2.2 使用免疫親和柱操作架可以使樣品凈化快速，提高檢測(cè)效率高

　　2.3 HPLC+FLD+KRC柱后衍生化,，有效提高檢測(cè)靈敏度,，實(shí)現(xiàn)較低的檢測(cè)限 (Aflatoxins B1 0.05ppb)。

　　2.4 衍生化操作方便,，光化學(xué)衍生化無(wú)需使用衍生試劑(通常電化學(xué)柱后衍生均需要使用衍生試劑,，分析成本高，操作麻煩,，儀器故障率較高),。

　　2.5 回收率高，達(dá)到90%以上

　　3 免疫親和柱法操作步驟簡(jiǎn)介：

　　3.1 提取樣品：研磨,、稱重50g樣品;用甲醇/水(80/20 V/V)混合物將樣品

　　高速混勻 1 分鐘,。

　　3.2 過(guò)濾：將提取的樣品濾膜過(guò) 玻璃纖維濾紙，

　　3.3 將回溫的免疫親和柱安裝在泵流操作架進(jìn)行過(guò)柱凈化：經(jīng)過(guò)PribofastAflatoxins 總量免疫親和柱(IAC-010-3)活化,、淋洗,、洗脫三步驟，洗脫下來(lái)的溶液可直接用于HPLC檢測(cè);

　　3.4 測(cè)定：HPLC直接進(jìn)樣,，經(jīng)色譜柱,、KRC光化學(xué)柱后衍生化后直接記錄Aflatoxins 濃度;

　　三、酶聯(lián)免疫法檢測(cè)Aflatoxins 總量

　　1 采取直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法,，利用酶標(biāo)儀測(cè)定樣品和標(biāo)準(zhǔn)品的樣本的吸光值計(jì)算得到樣品中Aflatoxins 素總量的含量,。

　　2 試劑盒檢測(cè)時(shí)間：15分鐘+15分鐘

　　3 檢測(cè)限：0.1ppb

　　關(guān)于Pribofast KRC 柱后衍生器和 HPLC參數(shù)

　　●Pribofast KRC 柱后光化學(xué)衍生器 波長(zhǎng)：254 nm

　　●HPLC-色譜柱： Aflatoxins 色譜柱150 x 4.6 mm; C-18

　　●流動(dòng)相: 甲醇/水 (45/ 55 v / v)

　　●流量：1.0 mL/min 柱溫： 30 °C

　　●進(jìn)樣體積：20μL

　　●熒光檢測(cè)器：λ-激發(fā)波長(zhǎng)：365 nm λ-發(fā)射波長(zhǎng)：440 nm

　　●液相色譜儀需要配制：PriboLab公司Pribofast KRC 柱后光化學(xué)衍生器，含有1ml反應(yīng)池,，納米燈管254nm

　　關(guān)于Aflatoxins 色譜柱：