一,、液相色譜儀峰分叉怎么回事?
造成這種情況的原因一般是色譜柱被污染,,或柱頭填料塌陷導(dǎo)致的。
對于*種情況,,先用純水反向沖洗柱子,,然后換成甲醇沖洗,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),,再換成甲醇沖洗,,然后用純水沖洗,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上,。如沖洗后依然出峰不佳,,則考慮第二種情況。
對于第二種情況,,擰開柱頭,,檢查柱填料是否硬結(jié)或塌陷。去除硬結(jié)部分(污染的填料),,裝入新填料,滴一滴甲醇,,填料下陷,,再填,用與柱內(nèi)徑相同的頂端平滑的不銹鋼桿壓緊,,再填平,,滴甲醇,再壓緊反復(fù)幾次,,直至裝滿填平,。柱頭用甲醇沖洗干凈,擦凈柱外壁的填料,,擰緊柱頭,,用純甲醇沖洗30分鐘以上。
二,、如何排除液相色譜儀氣泡溢出的故障?
流動相內(nèi)產(chǎn)生都無法清除不斷產(chǎn)生的氣泡,,主要是因為過濾器長期沉浸于乙酸銨等緩沖液內(nèi),過濾器內(nèi)部由于霉菌的生長繁殖,形成菌團,,阻塞了過濾器,,緩沖液難以流暢地通過過濾器,空氣在泵的壓力作用下經(jīng)過濾器進(jìn)入流動相,。
過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,,超聲清洗幾分鐘即可;亦可將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中12~36小時,輕輕震蕩幾次,,再將過濾器用純水清洗幾次,,打開泄壓閥,打開purge鍵清洗脫氣,,如仍有氣泡不斷從過濾器冒出,,繼續(xù)將過濾器浸泡于5%硝酸溶液中,如沒有氣泡不斷從過濾器中冒出,,說明過濾器內(nèi)部的霉菌菌團已被硝酸破壞,,流動相可以流暢地通過過濾器。打開泄壓閥,,打開泵,,流速調(diào)至1.0~3.0ml/min,純水沖洗過濾器1小時左右,。即可將過濾器清洗干凈,。關(guān)閉泄壓閥,純甲醇沖洗半小時即可,。
三,、自檢時,為什么有時會出現(xiàn)“鎢燈能量低”的錯誤?
一般來說,,原因是系統(tǒng)中有擋光物,,光路偏離,鎢燈電源系統(tǒng)或鎢燈燈泡已壞,。這時首先要檢查光度室是否有擋光物;打開檢測器光源室蓋,,檢查氘燈是否點亮;如果氘燈不亮,則關(guān)機,,更換新氘燈,,換時,需注意型號;檢查氘燈保險絲,,看是否松動,、氧化、燒斷;如果故障,,應(yīng)立即更換;再開機重新自檢;若仍出現(xiàn)上述故障,,則重新安裝軟件后再進(jìn)行自檢,。
四、出現(xiàn)壓力波動大,,流量不穩(wěn)定該怎么辦?
造成這種情況的原因是系統(tǒng)中有空氣或者單向閥的寶石球和閥座之間夾有異物,,使得兩者不能密封。處理工作中注意觀察流動相的量,,保證不銹鋼濾器沉入儲液器瓶底,,避免吸入空氣,流動相要充分脫氣,。如為單向閥和閥座之間夾有異物,,拆下單向閥,放入盛有丙酮的燒杯用超聲波清洗,。
五,、液相色譜儀峰面積重復(fù)性不好怎么回事?
主要原因可能有進(jìn)樣閥漏液、加樣針不到位或液量不足,。針對*種情況,,處理時應(yīng)對更換進(jìn)樣閥墊圈;對于第二種情況保證加樣針插到底,注射樣品溶液后須快速,、平穩(wěn)地從LOAD狀態(tài)轉(zhuǎn)換到INJECT狀態(tài),,以保證進(jìn)樣量的準(zhǔn)確。日常工作中,,液相色譜儀的保養(yǎng)非常重要,,如要注意不要讓空氣進(jìn)入輸液系統(tǒng)和高壓泵中,儲液器內(nèi)的溶液如長時間未用應(yīng)清洗儲液器并更換溶液,,每次用完色譜儀后緩沖液要用純水沖洗干凈,,防止無機鹽析出或沉積;樣品的前處理也很重要,任何樣品都要盡可能地去除雜質(zhì),,*溶解,,盡量減少對色譜柱的污染,以延長色譜柱的使用壽命,,同時避免注射過濃的樣品溶液,以免殘留液在進(jìn)樣閥內(nèi)析出固體引起堵塞;色譜柱作好標(biāo)記,,用于不同分析目的的色譜柱不要混用等,。
六、液相色譜柱壓升高的原因是什么?
造成柱壓升高的原因很多,。一般是由于柱床內(nèi)產(chǎn)生了異常的占位性物體,,造成流體阻力加大所引起的。例如,,緩沖液鹽分如(乙酸銨等)沉積于柱內(nèi),,或樣品污染沉積。針對*種情況,處理時應(yīng)先用40~50℃的純水,,低速正向沖洗柱子,,待柱壓逐漸下降后,相應(yīng)提高流速沖洗,,柱壓大幅度下降后,,用常溫純水沖洗,之后用純甲醇沖洗柱子30分鐘;對于第二種情況,,由樣品的沉積引起污染的C18柱,,和純水反向沖洗柱子,然后換成甲醇沖洗,,接著用甲醇+異丙醇(4+6)沖洗柱子(沖洗時間的長短由樣品污染的情況而定),,再用換成甲醇沖洗,然后用純水沖洗,,zui后甲醇沖洗正向沖洗柱子30分鐘以上,。
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