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元析分光光度計(jì)由即光源,、單色器、狹縫,、樣品池,,檢測(cè)器系統(tǒng)五部分組成。
一,、元析分光光度計(jì)光源
要求能提供所需波長(zhǎng)范圍的連續(xù)光譜,,穩(wěn)定而有足夠的強(qiáng)度。常用的有白熾燈,,氣體放電燈,金屬弧燈等多種,。
鎢燈和鹵鎢燈發(fā)射320-2000nm連續(xù)光譜,,zui適宜工作范圍為360-1000nm,穩(wěn)定性好,,用作可見(jiàn)光分光光度計(jì)的光源,。氫燈和氘燈能發(fā)射150-400nm的紫外結(jié),可用作紫外光區(qū)分光光度計(jì)的光源,。紅外線光源則由納恩斯特(Nernst)棒產(chǎn)生,,此棒由ZrO2:Y2O3=17:3(Zr為鋯,Y為釔)或Y2O3,GeO2(Ge為鈰)及ThO2(Th為釷)之混合物制成,。汞燈發(fā)射的不是連續(xù)光譜,, 能量絕大部分集中在253.6nm波長(zhǎng)外,一般作波長(zhǎng)校正用,。鎢燈在出現(xiàn)燈管發(fā)黑時(shí)應(yīng)及更換,,如換用的燈型號(hào)不同,還需要調(diào)節(jié)燈座的位置的焦距,。氫粘及氘燈的燈管或窗口是石英的,,且有固定的發(fā)射方向,,安裝時(shí)必須仔細(xì)校正接觸燈管時(shí)應(yīng)戴手套以防留下污跡。
二,、元析分光光度計(jì)分光系統(tǒng)
單色器是指能從混合光波中分解出來(lái)所需單一波長(zhǎng)光的裝置,,由棱鏡或光柵構(gòu)成。用玻璃制成的棱鏡色散力強(qiáng),,但只能在可見(jiàn)光區(qū)工作,,石棱鏡工作波長(zhǎng)范圍為185-4000nm,在紫外區(qū)有較好的分辯力而且也適用于可見(jiàn)光區(qū)和近紅外區(qū)。 棱鏡的特點(diǎn)是波長(zhǎng)越短,,色散程度越好,,越向長(zhǎng)波一側(cè)越差。所以用棱鏡的分光光度計(jì),,其波長(zhǎng)刻度在紫外區(qū)可達(dá)到0.2nm,而在長(zhǎng)波段只能達(dá)到5nm.有的分光光系統(tǒng)是衍射光柵,,即在石英或玻璃的表面上刻劃許多平行線,刻線處不透光,,于是通過(guò)光的干涉和衍射現(xiàn)象,,較長(zhǎng)的光波偏折的角度大,較短的光波偏折的角度小,,因而形成光譜,。
三、元析分光光度計(jì)狹縫
狹縫是指由一對(duì)隔板在光通路上形成的縫隙,,用來(lái)調(diào)節(jié)入射單色光的純度和強(qiáng)度,,也直接影響分辯力。狹縫可在0-2mm寬度內(nèi)調(diào)節(jié),,由于棱鏡色散力隨波長(zhǎng)不同而變化,,較先進(jìn)的分光光度計(jì)的狹縫寬度可隨波長(zhǎng)一起調(diào)節(jié)。
四,、元析分光光度計(jì)比色環(huán)
比爭(zhēng)環(huán)也叫樣品池,,吸收器或比色皿,用來(lái)盛溶液,,各個(gè)杯子壁厚度等規(guī)格應(yīng)盡可能*相等,,否則將產(chǎn)生測(cè)定誤差。玻璃比色杯只適用于可見(jiàn)光區(qū),,在紫外區(qū)測(cè)定時(shí)要用石英比色杯,。不能用手指拿比色杯的光學(xué)面,用后要及時(shí)洗滌,,可用溫水或稀鹽酸,,乙醇以至鉻酸洗液(濃酸中浸泡不要超過(guò)15分鐘),表面只能用柔軟的絨布或拭鏡頭紙擦凈。
五,、元析分光光度計(jì)檢測(cè)器系統(tǒng)
有許多金屬能在光的照射下產(chǎn)生電流,,光愈強(qiáng)電流愈大,此即光電效應(yīng),。因光照射而產(chǎn)生的電流叫做光電流,。受光器有兩種,一是光電池,,二是光電管,。光電池的組成種類(lèi)繁多,zui常見(jiàn)的是硒光電池,。光電池受光照射產(chǎn)生的電流頗大,,可直接用微電流計(jì)量出。但是,,當(dāng)連續(xù)照射一段時(shí)間會(huì)產(chǎn)生疲勞現(xiàn)象而使光電流下降,,要在暗中放置一些時(shí)候才能恢復(fù)。因此使用時(shí)不宜長(zhǎng)期照射,,隨用隨關(guān),,以防止光電池因疲勞而產(chǎn)生誤差。
光電管裝有一個(gè)陰極和一個(gè)陽(yáng)極,,陰極是用對(duì)光敏感的金屬(多為堿土金屬的氧化物)做成,,當(dāng)光射到陰極且達(dá)到一定能量時(shí),金屬原子中電子發(fā)射出來(lái),。光愈強(qiáng),,光波的振幅愈大,電子放出愈多,。電子是帶負(fù)電的,,被吸引到陽(yáng)極上而產(chǎn)生電流。光電管產(chǎn)生電流很小,,需要放大。分光光度計(jì)中常用電子倍增光電管,,在光照射下所產(chǎn)生的電流比其他光電管要大得多,,這就提高了測(cè)定的靈敏度。