高壓制備色譜的線性流速問題說明

閱讀：3244發(fā)布時(shí)間：2021-10-23

　　制備純化所用填料的平均粒徑從5-100um,所用流速差異很大,，每個(gè)工程師都有自己的經(jīng)驗(yàn)值,，基本是以分開為主但各有說辭,。高壓制備色譜以10um填料為主,，已廣泛應(yīng)用于胰島素,、多肽,、核酸,、抗生素、造影劑,、動(dòng)植物活性成份等難分離樣品,。

　　70年代分析液相色譜開始商品化。80,、90年代開始,，5um填料開始成為分析主流，直到現(xiàn)在還是各國(guó)藥典的常規(guī)標(biāo)準(zhǔn),。正好5um和10um填料的范德姆特方程能夠發(fā)現(xiàn),，要得到低的H值，10um顆粒的線速度的佳操作范圍非常窄,。如果流動(dòng)相的速度過慢或過快,，將會(huì)增加H，進(jìn)而降低色譜分離,。而5um的顆粒在較高的流動(dòng)相速度下有較低的H值同時(shí)有較大的線速度范圍,。

　　通過測(cè)算，發(fā)現(xiàn)對(duì)于5um填料的色譜柱,，佳線速度對(duì)應(yīng)的是大概是0.95mm/s,，而所用色譜儀都是需要設(shè)定體積流速ml/min的。線速度一定,，體積流速和色譜柱內(nèi)徑是有關(guān)的,。在色譜儀上輸入流速時(shí)，大家都覺得是1mL/min簡(jiǎn)單且不易出錯(cuò),，正是1mL/min對(duì)應(yīng)的是4.6mm內(nèi)徑色譜柱的佳流速,，而1.18mL/min對(duì)應(yīng)的是5mm內(nèi)徑色譜柱的佳流速（5um填料）。

　　同樣對(duì)于高壓制備色譜填料10um，內(nèi)徑4.6mm色譜柱佳的線性流速是0.7ml/min,。因此,，當(dāng)使用填料粒徑相同而柱管內(nèi)徑不同的柱子時(shí)，可由已知的一個(gè)規(guī)格色譜柱的佳流速F通過簡(jiǎn)單的換算,，即保持線速度不變,，線性流速和色譜柱的直徑平方成正比，就可以得到另一個(gè)規(guī)格的色譜柱的佳流速,，而在現(xiàn)實(shí)各藥廠中很多設(shè)備測(cè)試柱效依舊用50ml/min,，主要原因是有些設(shè)備廠家在做安裝啟動(dòng)時(shí)怕浪費(fèi)時(shí)間，如果是做樣品,，那就增長(zhǎng)了一個(gè)周期,，降低了產(chǎn)能。實(shí)際工作中,，如果在保證分離良好的條件下可以通過繼續(xù)增加流速縮短工藝周期的方式減弱佳線性流速對(duì)理論塔板數(shù)影響,，從而提高產(chǎn)能，降低單位產(chǎn)品的純化成本,。

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