如何選用特殊細(xì)胞系培養(yǎng)基,？ 
 

培養(yǎng)某一類型細(xì)胞沒有固定的培養(yǎng)條件。在MEM中培養(yǎng)的細(xì)胞,，很可能在DMEM或M199中同樣很容易生長(zhǎng),。總之，MEM做粘附細(xì)胞培養(yǎng),、RPMI-1640做懸浮細(xì)胞培養(yǎng)是一個(gè)好的開始,，各種目的無血清培養(yǎng)AIM V（12005）培養(yǎng)基（SFM）。

L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)中重要嗎,？它在溶液中不穩(wěn)定嗎,？ 
 L-谷氨酰胺在細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)是重要的。脫掉氨基后,，L-谷氨酰胺可作為培養(yǎng)細(xì)胞的能量來源,、參與蛋白質(zhì)的合成和核酸代謝。L-谷氨酰胺在溶液中經(jīng)過一段時(shí)間后會(huì)降解,，但是確切的降解率一直沒有zui終定論,。L-谷氨酰胺的降解導(dǎo)致氨的形成，而氨對(duì)于一些細(xì)胞具有毒性,。

GlutaMAX-I是什么,？培養(yǎng)細(xì)胞如何利用GlutaMAX-I？這個(gè)二肽有多穩(wěn)定,？ 
GlutaMAX-I 二肽是一個(gè)L-谷氨酰胺的衍生物,，其不穩(wěn)定的alpha-氨基用L-丙氨酸來保護(hù)。一種肽酶逐漸裂解二肽,，釋放L-谷氨酰胺供利用,。 GlutaMAX-I二肽非常穩(wěn)定，即使在121磅滅菌20分鐘,，GlutaMAX-I 二肽溶液有zui小的降解,，如果在相同條件下，L-谷氨酰胺幾乎*降解,。

什么培養(yǎng)基中可以省去加酚紅,？
  酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色,，堿性時(shí)為紫色,。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用,，（特別是雌激素）,。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞,，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。 酚紅在培養(yǎng)基中被用來作為PH值的指示劑：中性時(shí)為紅色，酸性時(shí)為黃色,，堿性時(shí)為紫色,。研究表明，酚紅可以模擬固醇類激素的作用,，（特別是雌激素）,。為避免固醇類反應(yīng)，培養(yǎng)細(xì)胞,，尤其是哺乳類細(xì)胞時(shí),，用不加酚紅的培養(yǎng)基。由于酚紅干擾檢測(cè),，一些研究人員在做流式細(xì)胞檢測(cè)時(shí),，不使用加有酚紅的培養(yǎng)基。 如何用臺(tái)盼蘭計(jì)數(shù)活細(xì)胞,？ 用無血清培養(yǎng)基把細(xì)胞懸液稀釋到200～2000個(gè)/毫升,，在0.1毫升的細(xì)胞懸液中加入0.1毫升的0.4％的臺(tái)盼蘭溶液。輕輕混勻,，數(shù)分鐘后,，用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)細(xì)胞?；罴?xì)胞排斥臺(tái)盼蘭,，因而染成藍(lán)色的細(xì)胞是死細(xì)胞。

如何消除組織培養(yǎng)的污染,？
  當(dāng)重要的培養(yǎng)污染時(shí),，研究者可能試圖消除或控制污染。首先,，確定污染物是細(xì)菌,、真菌、支原體或酵母,，把污染細(xì)胞與其它細(xì)胞系隔離開,，用實(shí)驗(yàn)室消毒劑消毒培養(yǎng)器皿和超凈臺(tái)，檢查HEPA過濾器,。 高濃度的抗生素和抗霉菌素可能對(duì)一些細(xì)胞系有毒性,，因而,，做劑量反應(yīng)實(shí)驗(yàn)確定抗生素和抗霉菌素產(chǎn)生毒性的劑量水平,。這點(diǎn)在使用抗生素如兩性霉素B和抗霉菌素如泰樂菌素時(shí)尤其重要。下面是推薦的確定毒性水平和消除培養(yǎng)污染的實(shí)驗(yàn)步驟,。 1. 在無抗生素的培養(yǎng)基中消化,、計(jì)數(shù)和稀釋細(xì)胞，稀釋到常規(guī)細(xì)胞傳代的濃度。 2. 分散細(xì)胞懸液到多孔培養(yǎng)板中,，或幾個(gè)小培養(yǎng)瓶中,。在一個(gè)濃度梯度范圍內(nèi)，把選擇抗生素加入到每一個(gè)孔中,。例如,，兩性霉素B推薦下列濃度，0.25,，0.50,，1.0，2.0,，4.0,8.0 mg/ml,。 3. 每天觀測(cè)細(xì)胞毒性指標(biāo)，如脫落,，出現(xiàn)空泡,，匯合度下降和變圓。4. 確定抗生素毒性水平后,，使用低于毒性濃度2～3倍濃度的抗生素的培養(yǎng)液培養(yǎng)細(xì)胞2～3代,。 5. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)細(xì)胞一代。 6. 重復(fù)步驟4,。 7. 在無抗生素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)4～6代,，確定污染是否以已被消除。

培養(yǎng)基中丙酮酸鈉的作用是什么,？
  丙酮酸鈉可以作為細(xì)胞培養(yǎng)中的替代碳源,，盡管細(xì)胞更傾向于以葡萄糖作為碳源，但是,，如果沒有葡萄糖的話,，細(xì)胞也可以代謝丙酮酸鈉。