中草藥化學(xué)成分提取的一種新方法和新設(shè)備
組織破碎法與閃式提取器
————中草藥化學(xué)成分提取的一種新方法和新設(shè)備
盧付軍1 劉延澤2 畢躍峰3 高志偉1
(1北京金鼐科技發(fā)展有限公司,,2美國哈佛大學(xué)醫(yī)學(xué)院生物有機(jī)和天然產(chǎn)物研究室,3鄭州大學(xué)藥學(xué)院)
摘要:組織破碎法是中草藥化學(xué)成分提取的一種新方法,,經(jīng)與傳統(tǒng)的提取方法及近年來出現(xiàn)的新技術(shù)如超臨界流體萃取技術(shù),、超聲提取法、微波萃取技術(shù)等相比較,,具有不需加熱,、快速安全、節(jié)能,、,、不破壞成分、宜各種溶劑等優(yōu)點(diǎn),;閃式提取器是根據(jù)組織破碎原理科學(xué)設(shè)計(jì)而成的一種新型提取器,,不但結(jié)構(gòu)簡單,操作方便,,而且快速,,適用廣泛,有利于我們方便,、快速,、地提取植物中的化學(xué)成分,是制劑生產(chǎn)和天然藥物研究工作的得力助手,。
關(guān)鍵詞:天然藥物研究 中藥化學(xué)成分 組織破碎法 閃式提取器
從20世紀(jì)中葉以來,,隨著自然科學(xué)技術(shù)的發(fā)展,許多新概念,、新方法,、新技術(shù)等,不斷向中藥研究領(lǐng)域滲透,,中藥研究學(xué)科也不斷分化,、衍生出了中藥資源學(xué),、中藥鑒定學(xué)、中藥炮制學(xué),、中藥化學(xué),、中藥藥理學(xué)、中藥毒理學(xué),、中藥制劑學(xué)等多個(gè)新興學(xué)科,。中藥研究出現(xiàn)了蓬勃發(fā)展之勢(shì)。目前國內(nèi)對(duì)中藥主要從以下七個(gè)方面進(jìn)行了大量的研究:
- 中藥材資源及質(zhì)量研究,。 截至目前,,我國的中藥種質(zhì)資源基本查清。1982年國家制定了對(duì)全國中藥資源進(jìn)行系統(tǒng)調(diào)查研究的計(jì)劃,,普查歷時(shí)10年,。結(jié)果表明,我國中藥資源達(dá)12807種,。其中藥用植物 11146種,,藥用動(dòng)物1581種,藥用礦物80種,。調(diào)查結(jié)果表明,,我國是世界藥用資源zui豐富的國家之一,zui豐富的地區(qū)要數(shù)西南和中南,,約占全國種類的 50~ 60%,,華東和西北地區(qū)居中,約占30%,,東北和華北地區(qū)約占 10%,。
對(duì)中藥質(zhì)量的研究主要從以下幾個(gè)方面開展:中藥材道地性系統(tǒng)研究;中藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)化研究,;中藥材采收加工,、貯藏、運(yùn)輸?shù)南嚓P(guān)性研究,;中藥質(zhì)量檢測(cè)方法的研究,;中藥飲片及炮制研究。
- 中藥化學(xué)(物質(zhì)基礎(chǔ))的研究,。(1)單味中藥的化學(xué)研究 ,。 (2)中藥方劑的化學(xué)研究 。(3)中藥化學(xué)成分的研究方法 ,。 中藥化學(xué)成分研究方法和手段的不斷改進(jìn),,將有可能給中藥物質(zhì)基礎(chǔ)的研究帶來突破性的進(jìn)展,從而加快中藥現(xiàn)代化進(jìn)程,。我國中藥化學(xué)成分研究的方法從憑借經(jīng)驗(yàn)觀察藥材的外觀形態(tài),、氣味,,進(jìn)入到利用超臨界萃取、超濾,、逆流色譜等來研究中藥的物質(zhì)基礎(chǔ),。目前已發(fā)展到利用X一射線衍射技術(shù)分析含礦物類中藥的方劑的質(zhì)量,應(yīng)用核磁共振技術(shù)對(duì)中藥天麻及其偽品進(jìn)行鑒別,。指紋圖譜定性,、各種氣相色譜一液相色譜及毛細(xì)管電泳手段業(yè)已用于中藥化學(xué)成分研究,且正在建立氣/液相色譜/毛細(xì)管電泳一質(zhì)譜聯(lián)用儀等快速,、,、微量的檢測(cè)方法和手段。天然植物研究中涉及的色譜(氣相色譜,、液相色譜,、凝膠滲透色譜、離子交換色譜,、薄層色譜及電泳等),,分子結(jié)構(gòu)測(cè)定過程中涉及的有機(jī)化學(xué)(有機(jī)分析、有機(jī)合成)波譜學(xué)(質(zhì)譜,、核磁共振譜以及紅外、紫外,、拉曼光譜,、X光衍射和圓二色光譜)、特別是超微量結(jié)構(gòu)分析技術(shù)和色譜與質(zhì)譜或光譜聯(lián)用技術(shù),、快原子轟擊一化學(xué)反應(yīng)質(zhì)譜,、質(zhì)譜等技術(shù)也正在中藥研究中得到應(yīng)用。
- 中藥藥理學(xué)研究,。
- 中藥毒理學(xué)研究,。
- 中藥制劑學(xué)研究。
- 中藥應(yīng)用理論研究,。
- 代生物技術(shù)在中藥基礎(chǔ)性研究中的應(yīng)用 ,。
中藥研究的快速發(fā)展也要求有與之相應(yīng)的高科技手段和方法提供技術(shù)保證,其核心工作都是對(duì)中藥的有效成分進(jìn)行各種各樣研究,。這就需要首先用各種手段把有效成分提取出來,,然后才能進(jìn)行以后的工作。所以,,中藥提取是進(jìn)行中草藥化學(xué)成分研究,、中藥藥理、制劑,、炮制研究,、動(dòng)植物的生物化學(xué)研究的重要的關(guān)鍵一步,,在醫(yī)藥工業(yè)、食品工業(yè),、化妝品及化學(xué)工業(yè)中占有及其重要的地位,,提取的*或成敗與否對(duì)今后的進(jìn)一步工作影響極大。
中草藥中的化學(xué)成分結(jié)構(gòu)千差萬別,,除了揮發(fā)油及個(gè)別易揮發(fā)的小分子化合物采用水蒸氣蒸餾提取外,,多是以適當(dāng)溶劑進(jìn)行提取,即溶劑法,,包括浸漬,、滲漉、回流,、連續(xù)回流,、煎煮等方法,所選用溶劑一般為水,、乙醇,、丙酮或甲醇及親脂性有機(jī)溶劑三類,根據(jù)“相似相溶”,、“加熱助溶”及少量多次的原理,,盡可能多、快,、好,、省的將所需有效成分從藥材中溶出。但上述方法存在著不少難以克服的矛盾和弊端,。如:1)盡管藥材經(jīng)過適當(dāng)?shù)那兴樘幚?,但溶劑浸入?nèi)部組織并達(dá)到組織內(nèi)外化學(xué)成分的溶出平衡,尚需較長時(shí)間,。2)有機(jī)溶劑回流提取每次需要1——2小時(shí)或更長時(shí)間,,并且需要重復(fù)提取3——5次;這樣要消耗大量的能源,、時(shí)間,、溶劑,如果加熱對(duì)于某些遇熱易變化的成分就更不適用,。3)冷浸或滲漉則需更長的時(shí)間和更多的溶劑,。4)超臨界萃取、超聲提取,、微波萃取等新技術(shù)往往投資過大,,每次處理藥材量較少。
九十年代初期,,日本生藥學(xué)家嘗試將生物組織搗碎機(jī)用于中藥丹寧成分的提取,,取得了舉世矚目的成就,,不但可以避免加熱,而且一次提取1——2分鐘即可完成,,提取效率,、收率大為提高。
其主要原理是:在適當(dāng)溶劑存在下,,利用高速機(jī)械剪切力和攪拌力,,迅速破壞植物細(xì)胞組織,使化學(xué)成分(或有效成分)與溶劑充分接觸,,使有效成分快速溶解轉(zhuǎn)移,,然后過濾即可。國內(nèi)藥學(xué)工作者受到啟迪,,并參考組織搗碎的原理和國外在丹寧研究中的應(yīng)用實(shí)例,,將此方法命名為組織破碎提取法,并據(jù)此設(shè)計(jì)發(fā)明了閃式提取器,,對(duì)含不同類型化學(xué)成分的中草藥進(jìn)行了研究,,取得了較好的效果。
國內(nèi)藥學(xué)工作者以芫花葉,、柳葉,、長白瑞香葉、尖瓣瑞香葉,、木瓜葉,、算盤子葉五種原料為試驗(yàn)對(duì)象,溶劑選用95%乙醇和70%丙酮,,分別用組織破碎提取法和回流提取法提取各原料的有效成分,試驗(yàn)結(jié)果表明,,回流提取2小時(shí)的收得率用組織破碎提取法僅用1分鐘即可達(dá)到相同收率,,效率是回流提取的100倍以上,且不需加熱,,節(jié)約了大量能源,。試驗(yàn)還表明,為了提高工作效率,,在某種情況下,,用破碎提取法溶劑選用70%丙酮效果優(yōu)于95%乙醇,如果提取受熱易破壞的成分,,組織破碎提取法是*選擇,。試驗(yàn)還對(duì)破碎提取后的藥渣進(jìn)行了干燥、過篩,、稱重,,能通過20目篩的部分可達(dá)85%以上,。【1】(《河南科學(xué)》Vol.11 No.4 劉延澤 袁珂 冀春茹——中草藥化學(xué)成分提取的新方法)
有文獻(xiàn)報(bào)道,分別用回流提取,、冷浸提取,、滲漉提取、破碎提取,、超聲波提取,、索氏提取六種方法提取忍冬葉中的綠原酸,結(jié)果表明,,在不同提取工藝中,,利用閃式提取器進(jìn)行破碎提取所提取的綠原酸含量zui高,而且提取快速,、*,,節(jié)省時(shí)間、溶劑和能源,,并且操作簡便,,效率是其它方法的幾十倍。【2】在對(duì)冬凌草中有效成分冬凌草甲素(萜類化合物)不同提取工藝的研究中,,也用了回流提取,、索氏提取、滲漉提取,、冷浸提取,、破碎提取五種方法作了提取收率的比較,結(jié)果證實(shí)破碎提取法提取的冬凌草甲素含量zui高,。【3】同樣,,用五種不同的提取方法(回流提取、索氏提取,、滲漉提取,、冷浸提取、破碎提?。?duì)車前草中的有效成分烏蘇酸進(jìn)行了收率和含量的測(cè)定比較,,研究結(jié)果再次表明用破碎提取法所提取的烏蘇酸含量zui高,而且與其它方法相比,,具有快速,、安全、不需加熱,,節(jié)省時(shí)間和能源等*的優(yōu)勢(shì),。【4】破碎提取法不需加熱的特點(diǎn)也使該方法應(yīng)用于不同來源訶子中3種可水解丹寧的定量分析【5】以及訶子葉與訶子硬種皮中丹寧反相液相色譜分析【6】等研究工作中,并都取得了滿意的效果。
目前提取黃酮,、香豆素類化合物多采用95%乙醇回流提取,,為了考察破碎提取法和回流提取法所得化學(xué)成分的異同,有藥學(xué)研究工作者在同樣條件下將兩法所得提取物進(jìn)行了初步的TLC比較分析,,結(jié)果基本一樣,。但破碎提取法所具有的快速、節(jié)省能源和試劑,、操作簡便等優(yōu)點(diǎn)是回流提取法所*的,。【1】
閃式提取器利用組織破碎原理,科學(xué)設(shè)計(jì),,不但結(jié)構(gòu)簡單,,操作方便,而且快速,,適用廣泛,,充分體現(xiàn)了組織破碎提取法的優(yōu)點(diǎn),有利于我們方便,、快速,、地提取植物中的化學(xué)成分,的確是制劑生產(chǎn)和新藥研制工作的得力助手,。象沖劑,、膠囊、袋泡茶等很多劑型是直接用藥材粉末制成,,它的優(yōu)點(diǎn)是簡單方便,,有效成分不受破壞,但缺點(diǎn)是有效成分的溶出率不高,,大大影響了療效,。如果利用閃式提取器,將藥材在適當(dāng)溶劑中勻漿破碎,,濃縮烘干或直接打粉做成各種制劑,,既快速、簡單方便,,保護(hù)了有效成分不受破壞,又大幅提高了活性成分的溶出與吸收,,從而使療效倍增,。經(jīng)過一些藥學(xué)科研工作者近二十年來的試用,*證實(shí)了其快速,、,、安全、節(jié)能、省時(shí),、簡便等*的優(yōu)點(diǎn),。
產(chǎn)品主要優(yōu)勢(shì)和特點(diǎn)
1.快速:
1~2分鐘即可完成對(duì)物料的*破碎提取,而且粉碎度(約20~40目)適當(dāng),,即有利于有效成分的溶解提取,,又有利于過濾。
2.常溫提?。?/span>
物料可在常溫下于溶劑中破碎提取,,避免有效成分因受熱遭到破壞。
3.適用廣泛:
- 適用于植物的根(飲片),、莖(飲片),、葉、花,、果實(shí)等各個(gè)部位的快速提取,。
- 適宜于多種溶劑。除乙謎等易燃易揮發(fā)溶劑不能適用外,,可根據(jù)所需部位或所需化學(xué)成分,,直接選用氯仿、丙酮(或含水丙酮),、甲醇(或含水甲醇),、乙醇(或含水乙醇)、冷熱水等作為溶劑進(jìn)行提取,,使工藝流程更加簡單方便,。
- 可單品種提取,也可多品種混合提取,。
4.操作方便:
單人即可操作,。將物料放入容器中,根據(jù)實(shí)際需要,,加入適量的溶劑,,調(diào)節(jié)好刀片位置后即可開機(jī),破碎提取可在瞬間完成,,20分鐘后過濾即可,。
閃式提取器為進(jìn)行中草藥中不耐熱成分的提取及提高提取效率展示了新的途徑,它不僅僅只是一種創(chuàng)新型的提取設(shè)備,,更是一種提取方法的革新……
它是我們?cè)诙嗄陱氖轮兴幯芯?、天然產(chǎn)物化學(xué)研究中,根據(jù)實(shí)際需求和希望的理想效果,,不斷探索不斷完善的結(jié)晶,,它快速、、節(jié)能,,適用于多種溶劑和植物的根,、莖、葉,、花,、果實(shí)等各個(gè)部位的提取,操作簡單方便,。
相信它能為您的研究和生產(chǎn)帶來的不單純是方便,,而是更多的驚喜,您的提取方法和手段從傳統(tǒng)走向現(xiàn)代和高科技……
參考文獻(xiàn)
1.劉延澤,、袁珂,、冀春茹,中草藥化學(xué)成分提取新方法:植物組織破碎提取法,?!逗幽峡茖W(xué)》1993.4.11;265~268頁
2.丁崗,、劉延澤,、王文領(lǐng),不同采收期訶子中三種可水解丹寧含量的反相液相色譜分析,?!吨袊兴庪s志》2000.6.23;328~330頁
3.丁崗,、劉延澤,、冀春茹,訶子葉與訶子硬種皮中丹寧反相液相色譜分析,?!稌r(shí)珍國藥雜志》2000.3.11;198~199頁
4.袁珂等,冬凌草不同提取工藝研究,。破碎提取法較其他提取法提取的冬凌草甲素含量高,。《中草藥》1997.28.7,;405~407頁
5.胡潤淮等,,忍冬葉不同提取工藝研究。破碎提取法提取的綠原酸含量高,,雜質(zhì)少,。河南省自然科學(xué)基金資助課題 NO.984024900 《中國中藥雜志》1999.24.9;540~542頁
6.袁珂等,,車前草不同提取工藝研究。破碎提取法所提取的烏蘇酸含量較高。河南省自然科學(xué)基金課題第9940240號(hào) 《中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)雜志》1999年8月第16卷第四期20~22頁