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手持ATP熒光檢測(cè)儀/手持ATP熒光檢測(cè)儀
微生物,、細(xì)菌及衛(wèi)生學(xué)潔凈度現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的新寵食品,、藥監(jiān)、醫(yī)院感控,、環(huán)境,、水質(zhì)、化妝品及衛(wèi)生監(jiān)督,、檢測(cè)
ATP細(xì)菌檢測(cè)原理及手段
/手持ATP熒光檢測(cè)儀
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ATP熒光法用于細(xì)菌檢測(cè)原理及儀器試劑ATP(Adenosine Triphosphate),，中文名為腺嘌呤核苷三磷酸，又叫三磷酸腺苷,。它普遍存在于細(xì)菌等微生物細(xì)胞內(nèi),，ATP是微生物新陳代謝的能量物質(zhì)。ATP生物發(fā)光法是利用ATP試劑中若干組分如熒光素-熒光素酶等與被測(cè)樣本反應(yīng)產(chǎn)生光子,，再利用專門研制的熒光檢測(cè)儀來(lái)捕捉和檢測(cè)發(fā)光值，由于被測(cè)樣本所含細(xì)菌等微生物的數(shù)量與所含的ATP值,、以及ATP值與發(fā)光值之間存在一定的函數(shù)關(guān)系,，因此通過(guò)檢測(cè)發(fā)光值即能得到被測(cè)標(biāo)本所含細(xì)菌等微生物含量。利用ATP檢測(cè)儀配合ATP試劑便可實(shí)現(xiàn)熒光法檢測(cè)細(xì)菌及潔凈度指標(biāo),。
國(guó)內(nèi)外ATP儀器及試劑
/手持ATP熒光檢測(cè)儀
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手持ATP儀比臺(tái)式ATP儀更適合現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè) 為了滿足現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)的需求,，ATP熒光檢測(cè)儀宜選擇手持ATP熒光檢測(cè)儀（也叫手持式ATP熒光檢測(cè)儀），而實(shí)現(xiàn)流動(dòng)狀態(tài)即時(shí)檢測(cè),，因?yàn)楸M管大型的臺(tái)式ATP熒光檢測(cè)儀在靈敏度方面可能優(yōu)于手持式ATP儀,但它只能在實(shí)驗(yàn)室狀態(tài)下使用,，不利于餐飲服務(wù)、醫(yī)療感控等流動(dòng)場(chǎng)所現(xiàn)場(chǎng)檢測(cè),。國(guó)外ATP檢測(cè)技術(shù)從上世紀(jì)90年開(kāi)始研究,，發(fā)展至今有了長(zhǎng)足的進(jìn)步和發(fā)展 ATP檢測(cè)技術(shù)實(shí)驗(yàn)結(jié)果準(zhǔn)確可靠，值得信賴。美國(guó)多個(gè)專業(yè)機(jī)構(gòu)研究了1000個(gè)以上的樣品,，這種只需十幾秒就能完成檢測(cè)的快速檢測(cè)法所得實(shí)驗(yàn)結(jié)果90%以上與24-48小時(shí)標(biāo)準(zhǔn)細(xì)菌培養(yǎng)法/平皿法所得結(jié)果一致,。測(cè)試飲用水時(shí)，比標(biāo)準(zhǔn)法靈敏度大100倍以上,，樣品量只要傳統(tǒng)方法的1/100,。本產(chǎn)品測(cè)定結(jié)果與傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法所得結(jié)果相比，相關(guān)性高達(dá)92-98%,。加拿大食品監(jiān)查協(xié)會(huì)經(jīng)過(guò)比對(duì)實(shí)驗(yàn)后發(fā)現(xiàn),，本產(chǎn)品測(cè)定結(jié)果與標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法的相關(guān)性是98%。美國(guó)FDA推薦使用ATP檢測(cè)系統(tǒng)和試劑盒用于牛奶細(xì)菌數(shù)的快速檢測(cè),。首屆中美食品安全及其全程控制研討會(huì)暨微生物快速自動(dòng)檢測(cè)技術(shù)培訓(xùn)班也將ATP快速檢測(cè)技術(shù)作為培訓(xùn)內(nèi)容之一,。在巴西召開(kāi)的第11屆世界滅菌大會(huì)暨第7屆滅菌與醫(yī)院感染控制論壇，與會(huì)專家做了ATP方法用于清洗效評(píng)價(jià)的研究報(bào)告,，結(jié)論是該方法效果和標(biāo)準(zhǔn)培養(yǎng)法基本一致,，所以在許多國(guó)家“醫(yī)用清潔評(píng)價(jià)”相關(guān)標(biāo)準(zhǔn)中，ATP方法被列入作為評(píng)價(jià)手段之一,。通過(guò)應(yīng)用和評(píng)估,，美國(guó)CDC制定的《醫(yī)療機(jī)構(gòu)消毒滅菌指南2008》也將ATP方法作為評(píng)價(jià)內(nèi)鏡清洗或內(nèi)鏡處理效果的新方法。
近幾年來(lái)國(guó)內(nèi)由于應(yīng)用需求牽引,，優(yōu)勢(shì)單位在研制出了具有自主知識(shí)產(chǎn)權(quán)的手持ATP 熒光檢測(cè)儀和ATP試劑并在多個(gè)領(lǐng)域的到成功應(yīng)用,。中國(guó)CDC有研究證實(shí)，ATP檢測(cè)結(jié)果與不同濃度的大腸桿菌,、金黃色葡萄球菌和血液成直線相關(guān),。通過(guò)ATP方法對(duì)細(xì)菌檢測(cè)和表面潔凈度檢測(cè)的應(yīng)用和技術(shù)評(píng)估，ATP熒光檢測(cè)儀已成為中國(guó)衛(wèi)生監(jiān)督和中國(guó)食品藥品監(jiān)督*部門的衛(wèi)生監(jiān)督和食品安全相關(guān)的檢測(cè)設(shè)備,，被國(guó)家用于食品加工,、儲(chǔ)存運(yùn)輸、貿(mào)易,、餐飲服務(wù)以及醫(yī)療系統(tǒng)物體表面及操作人員手等表面潔凈度快速測(cè)定,，并且以發(fā)放政府文件的方式要求購(gòu)買和配備ATP熒光檢測(cè)儀和配套試劑，作為衛(wèi)生監(jiān)督和食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)能力建設(shè)的重要舉措,。
國(guó)內(nèi)在2005年前后開(kāi)始進(jìn)行手持式ATP熒光檢測(cè)儀研制,，并且研發(fā)出*臺(tái)手持式ATP熒光檢測(cè)儀和2010年研制出現(xiàn)場(chǎng)快遞檢測(cè)ATP試劑一體化拭子，并且取得了國(guó)內(nèi)*手持式ATP熒光檢測(cè)系統(tǒng)相應(yīng)的發(fā)明,，隨著需求的擴(kuò)大和其產(chǎn)品儀器試劑逐步走向成熟,，國(guó)產(chǎn)產(chǎn)品銷售強(qiáng)勁增長(zhǎng)逐步替代了進(jìn)口儀器的份額。
◆從2005年即開(kāi)始手持式ATP熒光檢測(cè)儀及配套試劑研制◆2006年承擔(dān)西安市科技計(jì)劃項(xiàng)目“基于ATP熒光和焦磷酸測(cè)序的有害病源快速檢測(cè)系統(tǒng)及儀器”◆2007年手持式ATP熒光檢測(cè)系統(tǒng)申請(qǐng),，2009年獲得國(guó)家發(fā)明授權(quán)證書◆2007年手持式ATP熒光檢測(cè)儀獲得國(guó)家科技型中小企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新基金支持,，2010年并通過(guò)驗(yàn)收
手持式ATP熒光檢測(cè)儀獲得國(guó)家科技型中小企業(yè)技術(shù)創(chuàng)新基金支持
◆2007年獲得了質(zhì)量檢驗(yàn)機(jī)構(gòu)的檢驗(yàn)報(bào)告,，性能達(dá)到和超過(guò)相關(guān)部門規(guī)定指標(biāo)◆2008年獲國(guó)家重點(diǎn)新產(chǎn)品證書◆2009年開(kāi)始出口創(chuàng)匯◆2010年獲得陜西省二等獎(jiǎng)和西安市科技二等獎(jiǎng)各一項(xiàng)◆2010年獲全國(guó)發(fā)展展覽會(huì)銀獎(jiǎng)◆2012年現(xiàn)場(chǎng)快速一體化檢測(cè)ATP試劑獲得國(guó)家授權(quán)
◆時(shí)至2010年BioLum型手持式ATP熒光檢測(cè)儀和現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)ATP試劑一體化拭子進(jìn)入批量生產(chǎn)，性能達(dá)到和超過(guò)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求,，滿足食品藥品監(jiān)督部門,、衛(wèi)生監(jiān)督部門、食品加工行業(yè),、餐飲服務(wù)行業(yè),、航空配餐、大型企業(yè)食堂,、學(xué)校食堂,、大型活動(dòng)保障部門等食品安全涉及領(lǐng)域細(xì)菌和環(huán)境物體表面檢測(cè)、手衛(wèi)生檢測(cè),、餐飲具表面潔凈度檢測(cè),；化妝品制造業(yè)污染控制、醫(yī)院感染控制,、空氣細(xì)菌污染檢測(cè),、環(huán)境監(jiān)管部門等污染監(jiān)管領(lǐng)域細(xì)菌檢測(cè)和表面潔凈度檢測(cè)?！?011年,、2012年滿足上述國(guó)家衛(wèi)生監(jiān)督和食品藥品監(jiān)督部門等國(guó)家需求，替代進(jìn)口產(chǎn)品,?！?012年受國(guó)家863科技計(jì)劃和陜西省科技統(tǒng)籌創(chuàng)新工程計(jì)劃滾動(dòng)支持，進(jìn)一步研究用于醫(yī)用水質(zhì)檢測(cè),、醫(yī)療器械清洗后效果評(píng)價(jià)等更高性能ATP熒光檢測(cè)儀
國(guó)家法規(guī)要求使用ATP儀
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? GB 4789.3 食品衛(wèi)生微生物學(xué)檢驗(yàn)? GB 5749 生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)? WS/T 313醫(yī)務(wù)人員手衛(wèi)生規(guī)范? 藥品GMP認(rèn)證檢查評(píng)定標(biāo)準(zhǔn)國(guó)食藥監(jiān)安[2007]648號(hào)? 中國(guó)藥典2010版藥品微生物檢查法? 餐飲服務(wù)食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)設(shè)備? 燒傷病房/手術(shù)病房/普通病房物體表面衛(wèi)生學(xué)標(biāo)準(zhǔn)? 醫(yī)院感染監(jiān)測(cè)規(guī)范? 縣級(jí)衛(wèi)生監(jiān)督機(jī)構(gòu)現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)設(shè)備裝備標(biāo)準(zhǔn)（須配備ATP熒光檢測(cè)儀用于餐飲具,、食品加工工具、用具等物品表潔凈度快速測(cè)定）? 餐飲服務(wù)食品安全現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)設(shè)備配備基本標(biāo)準(zhǔn)（須配備ATP熒光檢測(cè)儀用于餐飲具,、食品加工工具,、用具等物品表潔凈度快速測(cè)定）
ATP方法使用和評(píng)價(jià)
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ATP熒光檢測(cè)法能在十幾秒內(nèi)實(shí)現(xiàn)檢測(cè)，它大大提升了傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)法24-48小時(shí)的工作效率,，ATP方法的實(shí)現(xiàn)包括儀器,、試劑和如何使用三大要素。
當(dāng)儀器和試劑配合使用,，整體靈敏度達(dá)到10-15-10-18摩爾 ATP范圍時(shí)，可以用于 食品表明微生物檢測(cè),、手衛(wèi)生檢測(cè),、餐飲器具潔凈度檢測(cè)、重點(diǎn)科室和重要活動(dòng)場(chǎng)所（如奧運(yùn)會(huì),、世博會(huì),、人大政協(xié)會(huì)議等）物表檢測(cè)和衛(wèi)生安保,、食品加工器具、工作臺(tái)等關(guān)鍵控制點(diǎn)消毒結(jié)果檢測(cè),、醫(yī)療環(huán)境工作平臺(tái)（器械表面,、內(nèi)窺鏡、空調(diào)進(jìn)出氣口）衛(wèi)生學(xué)即時(shí)評(píng)估,，其實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)數(shù)據(jù)能有效配合HACCP或GMP體系管理的要求,；當(dāng)儀器和試劑配合使用，整體靈敏度達(dá)到10-17-10-19摩爾ATP范圍時(shí),，可用于更高要求的檢測(cè)如復(fù)用醫(yī)療器械清洗效果后評(píng)估和二次清潔處理評(píng)價(jià),、醫(yī)療用水檢測(cè)等。當(dāng)然目前國(guó)外ATP設(shè)備和試劑的研發(fā)已經(jīng)向更高目標(biāo)——可檢測(cè)到1O-18至10-21摩爾水平的ATP努力,，檢測(cè)試劑也可達(dá)到5個(gè)細(xì)菌細(xì)胞的水平,。
的ATP試劑盒，必須是可去除游離ATP和體細(xì)胞ATP,，只針對(duì)細(xì)菌細(xì)胞ATP檢測(cè),，所謂去除干擾物，這是基本要求,。其次熒光素酶,、蟲螢光素、裂解液,、取樣拭子等組分設(shè)計(jì)成一體化,，整體便于現(xiàn)場(chǎng)攜帶方便檢測(cè)使用，試想如果不是ATP試劑一體化拭子形式,，而是各組分瓶瓶罐罐帶到現(xiàn)場(chǎng)臨時(shí)配制試劑如何能做到準(zhǔn)確性和現(xiàn)場(chǎng)快速檢測(cè)呢,？
是影響準(zhǔn)確性和一致性的關(guān)鍵之一，可按照<<醫(yī)院消毒衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn) 附錄A（規(guī)范性附錄）采樣及檢查方法>>等規(guī)范要求再參照手持式ATP儀說(shuō)明書采樣,、檢測(cè),、計(jì)算得出結(jié)果并記錄報(bào)告。采樣：（面積類）將ATP拭子采樣棒一支在物體表面或雙手指曲面從指跟到指端來(lái)回涂擦個(gè)兩次（一只手涂擦面積約30cm2）,，并隨之轉(zhuǎn)動(dòng)采樣拭子,。（體積類）將ATP拭子采樣棒一支在待測(cè)液體充分浸濕。檢測(cè)：將拭子放入手持ATP儀,，獲得被測(cè)樣本與細(xì)菌污染程度相對(duì)應(yīng)的ATP生物熒光值,，得出菌落數(shù)指標(biāo)（詳見(jiàn)下文操作步驟及定標(biāo)評(píng)價(jià)）。另外天隆牌ATP儀自帶的軟件能自動(dòng)將ATP熒光值儲(chǔ)存,、處理和傳輸,。如何使用 檢測(cè)操作步驟
手持式ATP 熒光檢測(cè)儀
結(jié)果判讀
/手持ATP熒光檢測(cè)儀
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以上取樣、檢測(cè)全過(guò)程在１分鐘之內(nèi)快速完成,，比起24-48小時(shí)的傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)優(yōu)勢(shì)巨大,。細(xì)菌數(shù)量與細(xì)菌內(nèi)所含ATP量有明確的相關(guān)性,，通過(guò)檢測(cè)ATP含量可間接得出細(xì)菌數(shù)量，即ATP熒光檢測(cè)儀檢測(cè)結(jié)果顯示的發(fā)光值——相對(duì)照度單位RLU讀數(shù)與常規(guī)細(xì)菌培養(yǎng)法結(jié)果菌落數(shù)CFU具有很高的相關(guān)性,，兩者沒(méi)有統(tǒng)計(jì)上的顯著差異,，因此這也是ATP熒光法細(xì)菌檢測(cè)的理論基礎(chǔ)。舉例來(lái)說(shuō),，某食品加工廠上班前使用ATP檢測(cè)儀對(duì)生產(chǎn)工人進(jìn)行手衛(wèi)生檢測(cè),，檢測(cè)值<80RLU合格參考值時(shí)，判定洗手消毒合格,；檢測(cè)值≥80RLU合格參考值時(shí)判定洗手消毒不合格,，需要重新洗手直至滿足規(guī)定的合格參考值才能上崗工作，合格參考值（如８０）的確定需科學(xué)合理,，不同應(yīng)用場(chǎng)合不建議規(guī)定統(tǒng)一的參考值,，須根據(jù)不同品牌ATP熒光儀、ATP試劑,、被測(cè)對(duì)象潔凈度不同要求等具體情況和對(duì)一定量的檢測(cè)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析來(lái)確定,。