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MTT細(xì)胞毒性試劑盒-MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒
  • MTT細(xì)胞毒性試劑盒-MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

貨物所在地:上海上海市

更新時間:2025-04-24 21:00:05

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上海雨晨生物技術(shù)有限公司為您提供:“MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒“,;了解更多信息請咨詢在線客服或銷售人員:
86-
M:(葉)

 產(chǎn)品名稱:MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒

內(nèi)容:    MTT染色液  5ml           Formazan溶解液     55ml

保存條件:MTT染色液需-20℃避光保存;Formazan溶解液可以室溫保存,。

產(chǎn)品簡介:

    1.MTT細(xì)胞增殖及細(xì)胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細(xì)胞增殖和細(xì)胞毒性的實驗方法,。由于細(xì)胞活力與細(xì)胞數(shù)呈正相關(guān),因此常常用來檢測細(xì)胞的增殖情況,。MTT可以被線粒體內(nèi)的一些脫氫酶還原生成結(jié)晶狀的深紫色產(chǎn)物formazan,。在特定溶劑存在的情況下,可以被*溶解,。然后通過酶標(biāo)儀可以測定570nm波長附近的吸光度,。細(xì)胞增殖越多越快,則吸光度越高,;細(xì)胞毒性越大,,則吸光度越低。

        2.本試劑盒采用了*的Formazan溶解液配方,,無需去除原有的培養(yǎng)液,,可以直接加入Formazan溶解液溶解formazan。從而避免了由于去除培養(yǎng)液時formazan被部分去除而引起的誤差。

        3.本試劑盒背景低,,靈敏度高,,線性范圍寬,使用方便提高了可靠性,。

        4.本產(chǎn)品為500 次(5個96孔細(xì)胞培養(yǎng)板)操作,。

使用說明:

 

1.收集對數(shù)期細(xì)胞,調(diào)整細(xì)胞懸液濃度,,每孔加入100ul,,鋪板使待測細(xì)胞調(diào)密度至1000-10000孔,(邊緣孔用無菌PBS填充),。

2.5%CO2,,37℃孵育,至細(xì)胞單層鋪滿孔底(96孔平底板,,具體每孔所用的細(xì)胞的數(shù)目,,需根據(jù)細(xì)胞的大小,細(xì)胞增殖速度的快慢等決定),。加入濃度梯度的藥物,,原則上,細(xì)胞貼壁后即可加藥,,或兩小時,,或半天時間,每孔0-10ul,,設(shè)3-5個復(fù)孔.建議設(shè)5個,。

3.5%CO2,37℃孵育16-48小時,,倒置顯微鏡下觀察。

4.每孔加入10微升MTT染色液,,繼續(xù)培養(yǎng)4h,。若藥物與MTT能夠反應(yīng),可先離心后棄去培養(yǎng)液,,小心用PBS沖2-3遍后,,再加入含MTT的培養(yǎng)液。

5.每孔加入100微升Formanzan溶解液,,置搖床上低速振蕩10-30min,,使結(jié)晶物充分溶解(如果仍有部分formazan未溶解,建議用移液器反復(fù)輕輕吹打2-3次避免產(chǎn)生氣泡或孵育溶解),。在酶聯(lián)免疫檢測儀570nm測定吸光度,。如無570nm濾光片,可以使用560-600nm的濾光片。

6.同時設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基,、MTT染色液,、Formanzan溶解液),對照孔(細(xì)胞,、相同濃度的藥物溶解介質(zhì),、培養(yǎng)液、MTT染色液,、Formanzan溶解液),。

注意事項:

1.由于使用96孔板進(jìn)行檢測,如果你的細(xì)胞要養(yǎng)48 h或更長,,建議不要吝嗇96-孔板的四周邊孔,,這32個邊孔不能使用,建議加入滅菌PBS以飽和中間64個孔的水分,。因為細(xì)胞培養(yǎng)過程中,,邊孔的水分蒸發(fā)很快,培養(yǎng)液及里面的藥物會出現(xiàn)濃縮現(xiàn)象,,細(xì)胞的狀況就復(fù)雜了,。

2.MTT溶劑在低溫情況下會凝固,使用前請室溫放置或20-25℃水浴溫育片刻至全部融解后使用,。

3.MTT一般4ºC避光保存兩周內(nèi)有效,,保存在-20度長期保存,避免反復(fù)凍融,,小劑量分裝,,用避光袋或是黑紙、錫箔紙包住避光以免分解,,尤其當(dāng)MTT變?yōu)榛揖G色時就不能再用了,。

4.Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進(jìn)溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用,。

5.孵育時,,須避光。

6.MTT有致癌性,,用的時候小心,,有條件帶那種透明的簿膜手套。配成的MTT需要無菌,,MTT對菌很敏感,。

 

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