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ELISA試劑盒   規(guī)格： 96T

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顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),，此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素,。在一定時(shí)間內(nèi),，陰性孔可保持無色，而陽性孔則隨時(shí)間的延長而呈色加強(qiáng),。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行,。在定量測定中，加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確,。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,，時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制，有時(shí)可根據(jù)陽性對(duì)照孔和陰性對(duì)照孔的顯色的情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時(shí)間,，及時(shí)判斷,。
　　OPD底物顯色一般在室外溫或37℃反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深，再延長反應(yīng)時(shí)間,，可使本底值增高,。OPD底物液受光照會(huì)自行變色，顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,，顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng),。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后，顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色,。
　　TMB受光照的影響不大,，可在室溫中置于操作臺(tái)上，邊反應(yīng)觀察結(jié)果,。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,，宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果。TMB經(jīng)HRP作用后,，約40分鐘顯色達(dá),，隨即逐漸減弱,，至2小時(shí)后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,，疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉（SDS）等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止,。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時(shí)間（12-24小時(shí)）不褪，是目視判斷的良好終止劑,。此外,，各類酸性終止液則會(huì)使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色，此時(shí)可用特定的波長（450nm）測讀吸光值,。