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當(dāng)前位置:上海蔚霆商貿(mào)有限公司>>ELISA試劑盒>>人類ELISA試劑盒>> bFGF-6試劑盒人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6 ELISA試劑盒

人堿性成纖維細(xì)胞生長因子6 ELISA試劑盒

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產(chǎn)品型號bFGF-6試劑盒

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更新時(shí)間:2019-06-28 16:06:23瀏覽次數(shù):207次

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顯色是ELISA中的后一步溫育反應(yīng),,此時(shí)酶催化無色的底物生成有色的產(chǎn)物。反應(yīng)的溫度和時(shí)間仍是影響顯色的因素,。在一定時(shí)間內(nèi),,陰性孔可保持無色,,而陽性孔則隨時(shí)間的延長而呈色加強(qiáng)。適當(dāng)提高溫度有助于加速顯色進(jìn)行,。在定量測定中,,加入底物后的反應(yīng)溫度和時(shí)間應(yīng)按規(guī)定力求準(zhǔn)確。定性測定的顯色可在室溫進(jìn)行,,時(shí)間一般不需要嚴(yán)格控制,,有時(shí)可根據(jù)陽性對照孔和陰性對照孔的顯色情況適當(dāng)縮短或延長反應(yīng)時(shí)間,及時(shí)判斷,。
  OPD底物顯色一般在室外溫或37反應(yīng)20-30分鐘后即不再加深,,再延長反應(yīng)時(shí)間,可使本底值增高,。OPD底物液受光照會自行變色,,顯色反應(yīng)應(yīng)避光進(jìn)行,顯色反應(yīng)結(jié)束時(shí)加入終止液終止反應(yīng),。OPD產(chǎn)物用硫酸終止后,,顯色由橙黃色轉(zhuǎn)向棕黃色。
  TMB受光照的影響不大,,可在室溫中置于操作臺上,,邊反應(yīng)觀察結(jié)果。但為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的穩(wěn)定性,,宜在規(guī)定的適當(dāng)時(shí)間閱讀結(jié)果,。TMB經(jīng)HRP作用后,約40分鐘顯色達(dá),,隨即逐漸減弱,,至2小時(shí)后即可*消退至無色。TMB的終止液有多種,,疊氮鈉和十二烷基硫酸鈉(SDS)等酶抑制劑均可使反應(yīng)終止,。這類終止劑尚能使藍(lán)色維持較長時(shí)間(12-24小時(shí))不褪,是目視判斷的良好終止劑,。此外,,各類酸性終止液則會使藍(lán)色轉(zhuǎn)變成黃色,此時(shí)可用特定的波長(450nm)測讀吸光值,。

 

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