貨號：WTA4014,，產(chǎn)品名稱：人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒,，英文名稱：Human free fatty acids,FFA ELISA Kit，規(guī)格：48T/96T

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人游離脂肪酸(FFA)ELISA試劑盒原理說明書實驗注意事項
1. 正式試驗時,，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件，待檢樣品應(yīng)作一式二份,，以保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,。有時本底較高，說明有非特異性反應(yīng),，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉。
2. 在人促生長激素釋放激素(GHRH)ELISA試劑盒中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的,，其中包括:
(1) 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯,、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板,、試管,、珠粒等。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體,，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性,，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
（2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間,。吸附溫度,，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1,、1.0和10μg／ml等)進行包被后,，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標(biāo)本的OD值,。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度,。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml。
(3) 酶標(biāo)記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標(biāo)記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物,、待檢樣品的參考品及酶標(biāo)記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準(zhǔn)確地滴定其工作濃度。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全,、有明顯地顯色反應(yīng)，而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用,，應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后,，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng)。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜,。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入,。