貨號：WTA3742，產(chǎn)品名稱：人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)ELISA試劑盒,，英文名稱：Human basic fibroblast growth factor 4,bFGF-4 ELISA Kit,，規(guī)格：48T/96T

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人堿性成纖維細胞生長因子4(bFGF-4)試劑盒原理實驗注意事項
1. 正式試驗時，應(yīng)分別以陽性對照與陰性對照控制試驗條件,，待檢樣品應(yīng)作一式二份,，以保證實驗結(jié)果的準確性。有時本底較高,，說明有非特異性反應(yīng)，可采用羊血清,、兔血清或BSA等封閉,。
2. 在人可溶性瘦素受體(sLR)ELISA試劑盒中,，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括:
(1) 固相載體的選擇：許多物質(zhì)可作為固相載體,，如聚氯乙烯,、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等,。其形式可以是凹孔平板,、試管、珠粒等,。目前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板,。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被,，在同一實驗條件下進行反應(yīng),，觀察其顯色反應(yīng)是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好,。
（2) 包被抗體(或抗原)的選擇：將抗體(或抗原)吸附在固相載體表面時,，要求純度要好,吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度,，時間及其蛋白量也有一定影響,一般多采用4℃18～24小時,。蛋白質(zhì)包被的最適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質(zhì)濃度(0.1、1.0和10μg／ml等)進行包被后,，在其它試驗條件相同時,，觀察陽性標本的OD值,。選擇OD值最大而蛋白量最少的濃度。對于多數(shù)蛋白質(zhì)來說通常為1～10μg／ml,。
(3) 酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定(見酶標記抗體部份),。然后再固定其它條件或采取“方陣法”(包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度)在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度,。
(4) 酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉,、安全、有明顯地顯色反應(yīng),，而本身無色,。有些供氫體(如OPD等)有潛在的致癌作用，應(yīng)注意防護,。有條件者應(yīng)使用不致癌,、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是目前較為滿意的供氫體,。底物作用一段時間后，應(yīng)加入強酸或強堿以終止反應(yīng),。通常底物作用時間,，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制,，尤其是H2O2在臨用前加入,。