SKHEP1人肝腹水腺癌細胞系
SKHEP1人肝腹水腺癌細胞系源自人體肝腹水腺癌組織,，作為ji具代表性的肝癌研究模型，在揭示肝臟惡性腫瘤轉(zhuǎn)移奧秘與開發(fā)靶向治療策略中占據(jù)重要地位,。于顯微鏡下觀察,，SKHEP-1 細胞形態(tài)復(fù)雜多變，以不規(guī)則形,、圓形為主,，呈現(xiàn)懸浮或半貼壁的特殊生長狀態(tài)，部分細胞相互聚集形成松散細胞團,，細胞邊界因形態(tài)不規(guī)則而模糊不清,。其胞質(zhì)豐富且經(jīng)染色后呈鮮明嗜酸性，腫脹的線粒體數(shù)量較正常肝細胞增加約 3 倍,，為癌細胞高強度代謝供能,；高度發(fā)達的內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體，加速異常蛋白的合成與加工,。細胞核大且畸形,，核質(zhì)比例嚴重失衡，核仁數(shù)量可達 2 - 3 個,，多核現(xiàn)象頻發(fā),，異常核分裂象占比超 15%，凸顯其惡性腫瘤細胞特質(zhì)。
SKHEP-1 細胞的生物學特性極為突出,。在增殖層面,，細胞周期蛋白 Cyclin E 和 CDK2 表達量較正常細胞上調(diào) 4 - 5 倍，驅(qū)動細胞周期進程紊亂,，24 - 36 小時即可完成倍增,。PI3K/AKT 通路中，PI3K 催化產(chǎn)生的 PIP3 招募 AKT 至細胞膜并使其磷酸化激活,，磷酸化 AKT 進一步抑制促凋亡蛋白 Bad 活性,，同時激活 mTORC1 通路，使細胞蛋白合成速率提升 60% ,，顯著增強細胞存活與增殖能力,；MAPK 通路中，RAS 蛋白激活 RAF 激酶,，經(jīng) MEK 傳遞磷酸化信號激活 ERK,，磷酸化的 ERK 入核后促進 c-Myc、Cyclin D1 等基因轉(zhuǎn)錄,，加速細胞周期運轉(zhuǎn),。侵襲轉(zhuǎn)移方面，SKHEP-1 細胞分泌的 MMP-9 酶活性是正常肝細胞的 8 - 10 倍,，可高效分解膠原蛋白,、層粘連蛋白等細胞外基質(zhì)成分；EMT 過程中,，E-cadherin 表達下調(diào) 40%,，N-cadherin 與 Vimentin 表達上調(diào) 50% 以上，賦予細胞間質(zhì)特性,，使其侵襲能力顯著增強,。此外，該細胞系對shun鉑耐藥倍數(shù)達 3.2,，為耐藥機制研究提供理想樣本,。
SKHEP-1 細胞的培養(yǎng)需嚴格遵循規(guī)范流程。選用含 10% 特級胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基,，搭配 1% 青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,，為細胞生長營造安全穩(wěn)定環(huán)境。培養(yǎng)箱需恒定維持 37℃溫度與 5% CO?濃度,，確保細胞內(nèi)酸堿平衡與酶活性,。當細胞密度達 5×10? - 1×10?個 /mL 時，采用離心（1000rpm,，5 分鐘）后更換新鮮培養(yǎng)液重懸細胞的方式傳代,，傳代比例依細胞狀態(tài)控制在 1:3 - 1:5 ,。凍存時，以 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜配制凍存液,，按程序降溫（ - 80℃過夜后轉(zhuǎn)入液氮）長期保存,。培養(yǎng)期間，每周通過臺盼藍染色檢測細胞活力,，每月采用 Western blot 分析蛋白表達水平,，監(jiān)測細胞特性穩(wěn)定性。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,，SKHEP-1 細胞系成果豐碩,。2024 年一項研究通過 CRISPR 技術(shù)敲除 SKHEP-1 細胞的 PTEN 基因，發(fā)現(xiàn) PI3K/AKT 通路活性進一步增強,，癌細胞遷移能力提升 70%,，揭示 PTEN 缺失在肝腹水腺癌進展中的關(guān)鍵作用。藥物研發(fā)方面,，新型靶向 AKT 變構(gòu)抑制劑 AZD5363 在 SKHEP-1 細胞實驗中,，可使細胞增殖抑制率達 82%，誘導凋亡率提升至 45%,；聯(lián)合使用 PD-1 抑制劑與 MEK 抑制劑,，可克服 SKHEP-1 細胞的部分耐藥性，為臨床聯(lián)合治療方案優(yōu)化提供有力支撐,。
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