A2780人卵巢癌細胞系
A2780人卵巢癌細胞系源自人體卵巢癌組織,,是研究卵巢癌發(fā)病機制,、開發(fā)新型治療方案及篩選抗癌藥物的重要實驗?zāi)P汀T陲@微鏡下,,A2780 細胞呈現(xiàn)出典型的癌細胞形態(tài)特征,,多為不規(guī)則多邊形,以貼壁方式生長,,細胞間連接松散,,常堆疊形成多層細胞集落。細胞胞質(zhì)豐富,,經(jīng)染色后呈嗜酸性,,內(nèi)部細胞器異常發(fā)達,線粒體數(shù)量增多且形態(tài)腫脹,,為癌細胞的快速增殖提供充足能量,;內(nèi)質(zhì)網(wǎng)與高爾基體擴張,,參與合成和分泌大量促癌蛋白及細胞因子。細胞核大而畸形,,核質(zhì)比例嚴重失調(diào),,核仁明顯且數(shù)目增多,異常核分裂象頻繁出現(xiàn),,這些形態(tài)學(xué)表現(xiàn)充分體現(xiàn)了其惡性腫瘤細胞的本質(zhì),。
A2780 細胞具有復(fù)雜且du特的生物學(xué)特性。在細胞增殖調(diào)控方面,,其細胞周期蛋白 Cyclin D1,、CDK4 表達顯著上調(diào),驅(qū)動細胞周期加速運轉(zhuǎn),,在適宜培養(yǎng)條件下,,細胞倍增時間約為 24 - 30 小時。細胞內(nèi)的 PI3K/AKT,、MAPK 等信號通路異常激活,,PI3K/AKT 通路激活后,AKT 蛋白磷酸化水平顯著升高,,通過抑制促凋亡蛋白 Bad,、激活 mTORC1,增強細胞代謝活性并抑制細胞凋亡,,從而促進細胞存活與增殖,;MAPK 通路中的 BRAF、MEK,、ERK 蛋白組成的級聯(lián)反應(yīng)持續(xù)活躍,,持續(xù)激活下游轉(zhuǎn)錄因子,調(diào)控細胞周期相關(guān)基因表達,,促使細胞快速通過 G1 期進入 S 期,。在侵襲轉(zhuǎn)移能力上,A2780 細胞分泌基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP - 2 和 MMP - 9 的能力較強,,這些蛋白酶可降解細胞外基質(zhì)中的膠原蛋白,、層粘連蛋白等成分,破壞基底膜完整性,;細胞表面整合素家族蛋白和上皮 - 間質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)相關(guān)蛋白表達上調(diào),,增強細胞與細胞外基質(zhì)的黏附、脫離能力,,以及細胞的遷移能力,,助力癌細胞突破卵巢組織屏障,、發(fā)生遠處轉(zhuǎn)移,。此外,,A2780 細胞對傳統(tǒng)hua療藥物如shun鉑、紫shan醇存在一定耐藥性,,耐藥相關(guān)蛋白如 P - gp,、MRP1 在細胞表面高表達,導(dǎo)致藥物外排增加,,這一特性使其成為研究卵巢癌耐藥機制的理想樣本,。
培養(yǎng) A2780 人卵巢癌細胞系需遵循嚴格的操作規(guī)范。常用含 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基作為基礎(chǔ)培養(yǎng)體系,,胎牛血清中豐富的生長因子,、激素和營養(yǎng)物質(zhì),能夠充分滿足細胞生長和代謝需求,;添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,,防止細菌污染。將細胞置于 37℃,、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,,模擬人體生理環(huán)境,維持細胞內(nèi)酸堿平衡與酶活性,。當(dāng)細胞匯合度達到 80% - 90% 時,,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進行消化傳代,消化過程需在顯微鏡下實時觀察,,避免過度消化損傷細胞,,傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時,,采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,,遵循程序降溫原則,先于 - 80℃冰箱過夜,,再轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存,。在培養(yǎng)過程中,還需定期通過臺盼藍染色檢測細胞活力,、利用 Western blot 檢測 CA125,、OVCAR 等標志物表達,確保細胞特性穩(wěn)定,,為實驗提供可靠的細胞模型,。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,A2780 細胞系發(fā)揮著不可替代的作用,。在卵巢癌發(fā)病機制研究中,,科研人員借助該細胞系深入探究 BRCA1、BRCA2 等基因突變與卵巢癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)聯(lián),,發(fā)現(xiàn) BRCA1 基因突變可協(xié)同激活 PI3K/AKT 通路,,加速卵巢癌細胞惡性轉(zhuǎn)化,。在藥物研發(fā)方面,A2780 細胞是篩選抗卵巢癌藥物的重要模型,,新型的 PARP 抑制劑在該細胞系實驗中,,能夠顯著抑制細胞增殖、誘導(dǎo)細胞凋亡,;針對其耐藥特性開展的聯(lián)合用藥研究,,如shun鉑聯(lián)合 P - gp 抑制劑,在 A2780 細胞上取得了良好的協(xié)同抗腫瘤效果,,為臨床卵巢癌治療提供了新策略,。此外,A2780 細胞還用于評估卵巢癌的新型治療方案,,如納米顆粒載藥系統(tǒng),、免疫細胞治療策略等,持續(xù)推動卵巢癌診療技術(shù)的發(fā)展,。
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