HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞系
HL-7702[L-02]人肝細(xì)胞系源自人正常肝細(xì)胞,，是研究肝臟生理功能,、疾病發(fā)病機制以及藥物研發(fā)的重要細(xì)胞模型,。在顯微鏡下觀察,，HL-7702 [L-02] 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的上皮樣細(xì)胞形態(tài)，多為多邊形,，以貼壁方式緊密排列生長,，細(xì)胞間連接緊密，常形成類似肝小葉樣的細(xì)胞結(jié)構(gòu),。細(xì)胞胞質(zhì)豐富,，染色后呈嗜酸性，內(nèi)部細(xì)胞器高度發(fā)達(dá)且功能完備,。線粒體呈短棒狀,，大量分布于胞質(zhì)中，為細(xì)胞的高強度代謝活動提供充足能量,；內(nèi)質(zhì)網(wǎng)分為粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng),，粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)參與蛋白質(zhì)合成，滑面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)則承擔(dān)脂質(zhì)代謝,、藥物解毒等重要功能,；高爾基體呈網(wǎng)狀結(jié)構(gòu)，參與蛋白質(zhì)的糖基化修飾與運輸,；細(xì)胞核大而圓,，通常位于細(xì)胞中央，染色質(zhì)分布均勻，核仁明顯,，體現(xiàn)出細(xì)胞的正常生理狀態(tài)與活躍的生命活動,。
HL-7702 [L-02] 細(xì)胞保留了許多人正常肝細(xì)胞的生物學(xué)特性。在代謝功能方面,，該細(xì)胞系具備強大的生物轉(zhuǎn)化能力，細(xì)胞內(nèi)含有豐富的細(xì)胞色素 P450 酶系,，如 CYP1A2,、CYP2E1 等，能夠?qū)Χ喾N內(nèi)源性和外源性物質(zhì)進行氧化,、還原,、水解等代謝反應(yīng)，在藥物代謝研究中,，可用于評估藥物在肝臟中的代謝途徑與代謝產(chǎn)物,。在合成功能上，HL-7702 [L-02] 細(xì)胞能夠合成多種血漿蛋白,，如白蛋白,、轉(zhuǎn)鐵蛋白等，其合成過程受到多種轉(zhuǎn)錄因子如 HNF1α,、HNF4α 的精細(xì)調(diào)控,，這些蛋白對于維持機體的營養(yǎng)運輸、滲透壓平衡等生理功能至關(guān)重要,。此外,，該細(xì)胞系還具有一定的再生修復(fù)能力，在受到輕微損傷時,，細(xì)胞可通過激活 Wnt/β-catenin,、Hippo 等信號通路，促進細(xì)胞增殖,，實現(xiàn)自我修復(fù),，但與原代肝細(xì)胞相比，其再生能力存在一定局限性,。同時,，HL-7702 [L-02] 細(xì)胞對多種肝臟損傷因素敏感，如酒精,、重金屬,、病毒感染等，可用于模擬肝臟疾病的發(fā)生發(fā)展過程,。
培養(yǎng) HL-7702 [L-02] 人肝細(xì)胞系需嚴(yán)格遵循特定的培養(yǎng)條件和操作規(guī)范,。基礎(chǔ)培養(yǎng)基通常選用含 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清的 RPMI 1640 培養(yǎng)基，胎牛血清中的生長因子,、激素和營養(yǎng)物質(zhì),，能夠滿足細(xì)胞生長和代謝需求；添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,，防止細(xì)菌污染,；同時，還可根據(jù)實驗需求添加胰島素,、轉(zhuǎn)鐵蛋白等補充劑,，維持細(xì)胞的正常功能。將細(xì)胞置于 37℃,、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,，模擬人體生理環(huán)境，維持細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡與酶活性,。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時,，使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液進行消化傳代，消化過程需在顯微鏡下實時觀察,，避免過度消化損傷細(xì)胞,，傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 。凍存時,，采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,，遵循程序降溫原則，先于 - 80℃冰箱過夜,，再轉(zhuǎn)移至液氮中長期保存,。在培養(yǎng)過程中，需定期通過臺盼藍(lán)染色檢測細(xì)胞活力,，利用 Western blot 檢測白蛋白,、細(xì)胞色素 P450 酶等標(biāo)志物表達(dá)，確保細(xì)胞特性穩(wěn)定,。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,，HL-7702 [L-02] 細(xì)胞系發(fā)揮著關(guān)鍵作用。在肝臟疾病研究中,，科研人員利用該細(xì)胞系模擬病毒性肝炎,、脂肪肝、肝纖維化等疾病的病理過程,，探究疾病發(fā)生發(fā)展的分子機制,，如通過感染乙型肝炎病毒，研究病毒與肝細(xì)胞的相互作用及細(xì)胞內(nèi)信號通路的改變,。在藥物研發(fā)方面,，HL-7702 [L-02] 細(xì)胞是評估藥物肝毒性的重要模型,，新型藥物在該細(xì)胞系上的實驗，能夠檢測藥物對肝細(xì)胞代謝功能,、細(xì)胞活力和形態(tài)結(jié)構(gòu)的影響,，為藥物安全性評價提供數(shù)據(jù)支持；同時,，也可用于篩選具有肝保護作用的藥物,，如天然化合物水fei薊賓在該細(xì)胞系實驗中，展現(xiàn)出良好的抗肝損傷和抗氧化效果,。此外,，HL-7702 [L-02] 細(xì)胞還用于肝臟細(xì)胞生物學(xué)研究，幫助揭示肝細(xì)胞增殖,、分化和凋亡的調(diào)控機制，為肝臟再生醫(yī)學(xué)和細(xì)胞治療研究奠定基礎(chǔ),。
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