Hep3B人肝癌細(xì)胞系
Hep3B人肝癌細(xì)胞系源于人體肝細(xì)胞癌組織，是研究肝癌發(fā)生發(fā)展機(jī)制,、評(píng)估抗癌藥物療效的經(jīng)典細(xì)胞模型,。顯微鏡下，Hep3B 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的上皮樣癌細(xì)胞形態(tài),，多為多邊形或不規(guī)則形,，以貼壁方式緊密附著在培養(yǎng)瓶底部，細(xì)胞間連接緊密,，常堆疊形成多層細(xì)胞集落,，部分區(qū)域可見(jiàn)細(xì)胞呈 “鋪路石" 樣排列。細(xì)胞胞質(zhì)豐富,，染色后呈嗜酸性,，內(nèi)部線粒體、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)等細(xì)胞器異常發(fā)達(dá),，為癌細(xì)胞快速增殖提供能量與物質(zhì)基礎(chǔ),；細(xì)胞核大且深染，核質(zhì)比例失調(diào),，核仁明顯且數(shù)目增多,，還可見(jiàn)異常核分裂象，彰顯其惡性腫瘤細(xì)胞的特性,。
Hep3B 細(xì)胞的培養(yǎng)需要嚴(yán)格把控各個(gè)環(huán)節(jié),。在培養(yǎng)基選擇上，常用含 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清的高糖 DMEM 培養(yǎng)基,。高糖 DMEM 為細(xì)胞提供葡萄糖,、氨基酸等豐富營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)，滿(mǎn)足其旺盛的代謝需求,；10% 的胎牛血清中富含生長(zhǎng)因子,、激素和多種活性物質(zhì)，能夠促進(jìn)細(xì)胞貼壁,、增殖,。同時(shí)，添加 1% 的青mei素 - 鏈mei素雙抗溶液,，防止細(xì)菌污染,，確保細(xì)胞健康生長(zhǎng)。培養(yǎng)環(huán)境至關(guān)重要,，將細(xì)胞置于 37℃,、5% 二氧化碳的恒溫培養(yǎng)箱中,，37℃模擬人體體溫，為細(xì)胞內(nèi)酶促反應(yīng)提供適宜溫度,；5% 的二氧化碳可維持培養(yǎng)液 pH 值穩(wěn)定在 7.2 - 7.4,，保障細(xì)胞內(nèi)酸堿平衡和正常代謝。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),，需及時(shí)進(jìn)行傳代,。使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 溶液消化細(xì)胞，消化時(shí)將培養(yǎng)瓶置于顯微鏡下觀察,，待細(xì)胞變圓,、間隙增大時(shí)，立即加入含血清的培養(yǎng)基終止消化,，通過(guò)離心去除舊培養(yǎng)液,，用新鮮培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，傳代比例一般控制在 1:3 - 1:5 ,。若需長(zhǎng)期保存細(xì)胞,，則進(jìn)行凍存操作，采用 90% 胎牛血清與 10% 二甲基亞砜混合凍存液,，將細(xì)胞重懸后,，先置于 - 80℃冰箱過(guò)夜，再轉(zhuǎn)入液氮中長(zhǎng)期保存,，整個(gè)過(guò)程遵循程序降溫原則,，減少細(xì)胞損傷。在培養(yǎng)過(guò)程中,，需定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行檢測(cè),，包括觀察細(xì)胞形態(tài)、檢測(cè)細(xì)胞活力（如臺(tái)盼藍(lán)染色法）,、測(cè)定細(xì)胞生長(zhǎng)曲線等，確保細(xì)胞狀態(tài)良好,，維持細(xì)胞系的生物學(xué)特性穩(wěn)定,。
從生物學(xué)特性來(lái)看，Hep3B 細(xì)胞具有旺盛的增殖能力,，細(xì)胞周期調(diào)控異常,，Cyclin D1、CDK4 等細(xì)胞周期蛋白高表達(dá),，驅(qū)動(dòng)細(xì)胞快速通過(guò) G1 期進(jìn)入 S 期,，在適宜條件下，細(xì)胞倍增時(shí)間約為 24 - 36 小時(shí),。其內(nèi)部 Wnt/β-catenin,、PI3K/AKT 等信號(hào)通路異常激活,，Wnt/β-catenin 通路激活后，β-catenin 蛋白在細(xì)胞質(zhì)中大量積累并轉(zhuǎn)入細(xì)胞核,，激活下游促癌基因的轉(zhuǎn)錄,；PI3K/AKT 通路則抑制細(xì)胞凋亡，增強(qiáng)細(xì)胞代謝活性,，促進(jìn)癌細(xì)胞的存活與增殖,。此外，Hep3B 細(xì)胞還具備較強(qiáng)的侵襲轉(zhuǎn)移能力,，能夠分泌基質(zhì)金屬蛋白酶 MMP-2 和 MMP-9,，降解細(xì)胞外基質(zhì)成分，為癌細(xì)胞遷移創(chuàng)造條件,。
在科研應(yīng)用領(lǐng)域,，Hep3B 細(xì)胞系發(fā)揮著不可替代的作用。在肝癌發(fā)病機(jī)制研究中,，科研人員借助該細(xì)胞系深入探究基因突變與肝癌發(fā)生發(fā)展的關(guān)系,；在藥物研發(fā)方面，它是篩選抗肝癌藥物的重要工具,，無(wú)論是傳統(tǒng)hua療藥物,，還是新型靶向藥物、免yi治療藥物,，都需在 Hep3B 細(xì)胞上進(jìn)行初步的藥效評(píng)估,，以確定藥物對(duì)肝癌細(xì)胞的抑制效果和作用機(jī)制，助力開(kāi)發(fā)更有效的肝癌治療方案,。
以上信息僅供參考,，詳細(xì)信息請(qǐng)聯(lián)系我們。
會(huì)員.png)
13
化工儀器網(wǎng)