A-673 [A673]人橫紋肌肉瘤細(xì)胞系
A-673 [A673]人橫紋肌肉瘤細(xì)胞系在腫瘤生物學(xué)研究與治療探索的征程中,,作為重要的研究工具,為科研人員深入了解橫紋肌肉瘤的發(fā)病機(jī)制,、開發(fā)新型治療策略提供了有力支撐,。該細(xì)胞系源自一名 1 歲男性患者的橫紋肌肉瘤組織,經(jīng)分離培養(yǎng)后,,成為研究這一惡性腫瘤的經(jīng)典模型,。
從生物學(xué)特性來看,A-673 細(xì)胞呈現(xiàn)典型的貼壁生長特性,,細(xì)胞形態(tài)不規(guī)則,,多為梭形或多邊形,部分細(xì)胞會展現(xiàn)出類似肌管的融合形態(tài),,這與橫紋肌肉瘤細(xì)胞向肌源性分化的特性相呼應(yīng),。該細(xì)胞系具有高度惡性的增殖能力,,細(xì)胞周期調(diào)控紊亂,能夠在體外快速增殖形成致密的細(xì)胞單層,。在分子層面,,A-673 細(xì)胞表達(dá)多種橫紋肌肉瘤相關(guān)標(biāo)志物,如肌細(xì)胞生成素(Myogenin),、結(jié)蛋白(Desmin),,同時(shí)攜帶致癌基因突變,其中 PAX3 - FOXO1 基因融合是其標(biāo)志性特征,,該融合基因通過激活下游信號通路,,驅(qū)動腫瘤細(xì)胞的增殖、遷移與侵襲,。此外,,A-673 細(xì)胞對傳統(tǒng)hua療藥物(如阿mei素、異環(huán)lin酰胺)存在一定耐藥性,,這一特性為研究腫瘤耐藥機(jī)制提供了理想的實(shí)驗(yàn)對象。
在細(xì)胞培養(yǎng)與維護(hù)方面,,A-673 細(xì)胞對培養(yǎng)條件有著特定要求,。常用培養(yǎng)基為添加 10% 胎牛血清(FBS)、1% 雙抗(青mei素 - 鏈mei素)的 DMEM 高糖培養(yǎng)基,,以滿足細(xì)胞生長所需的營養(yǎng)物質(zhì)并維持無菌環(huán)境,。培養(yǎng)環(huán)境需嚴(yán)格控制在 37℃、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中,,pH 值穩(wěn)定在 7.2 - 7.4 之間,。當(dāng)細(xì)胞匯合度達(dá)到 80% - 90% 時(shí),需及時(shí)進(jìn)行傳代,,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化細(xì)胞,,消化時(shí)間需精準(zhǔn)把控,避免過度消化損傷細(xì)胞,,傳代比例一般為 1:3 - 1:5,。為確保細(xì)胞特性穩(wěn)定,建議使用低代次(通常不超過 20 代)細(xì)胞進(jìn)行實(shí)驗(yàn),,并定期通過細(xì)胞形態(tài)學(xué)觀察,、MTT 法檢測細(xì)胞活力、免疫熒光染色分析標(biāo)志物表達(dá)等方式監(jiān)測細(xì)胞狀態(tài),,同時(shí)做好低溫凍存工作,。
A-673 細(xì)胞系在科研與醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的應(yīng)用十分廣泛。在基礎(chǔ)研究中,,它是解析橫紋肌肉瘤發(fā)生發(fā)展分子機(jī)制的核心模型,,科研人員通過基因編輯技術(shù)敲低或過表達(dá)關(guān)鍵基因,,探究 PAX3 - FOXO1 融合基因及其下游信號通路(如 PI3K-AKT、MAPK 通路)在腫瘤形成中的作用,。在藥物研發(fā)方面,,A-673 細(xì)胞可用于高通量篩選潛在的抗癌藥物,評估藥物對腫瘤細(xì)胞增殖,、凋亡,、遷移的影響,以及聯(lián)合用藥方案克服耐藥的效果,。此外,,該細(xì)胞系還能用于開發(fā)免yi治療策略,如基于 CAR-T 細(xì)胞療法或腫瘤疫苗的研究,,通過靶向 A-673 細(xì)胞表面特異性抗原,,驗(yàn)證免疫細(xì)胞對腫瘤細(xì)胞的殺傷能力,為橫紋肌肉瘤的臨床治療提供新的思路和方法,。
盡管 A-673 細(xì)胞系在橫紋肌肉瘤研究中發(fā)揮著重要作用,,但其應(yīng)用也存在一定局限性。作為永生化細(xì)胞系,,其基因表達(dá)譜與患者原發(fā)腫瘤存在差異,,且缺乏體內(nèi)復(fù)雜的腫瘤微環(huán)境。未來,,隨著類器官技術(shù),、單細(xì)胞測序和 3D 培養(yǎng)技術(shù)的發(fā)展,A-673 細(xì)胞有望與這些前沿技術(shù)結(jié)合,,構(gòu)建更貼近體內(nèi)真實(shí)情況的研究模型,,推動橫紋肌肉瘤的精準(zhǔn)診療邁向新的高度。
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