293 Cells, low passage人胚腎細胞系
293 Cells, low passage人胚腎細胞系在生命科學研究與生物技術產(chǎn)業(yè)中,憑借du特的生物學特性和廣泛的應用價值,,成為科研人員手中的 “利器",。該細胞系源于 1973 年,由荷蘭科學家 Alex van der Eb 從人胚腎組織分離獲得,,經(jīng)腺病毒 5 型(Ad5)DNA 片段轉化后實現(xiàn)永生化,。“l(fā)ow passage" 即低代次,,指細胞傳代次數(shù)較少(通常不超過 20 代),,此時細胞保留了更原始的生物學特性,遺傳穩(wěn)定性和功能完整性更高,。
從生物學特性來看,,293 Cells, low passage 呈現(xiàn)典型的上皮樣細胞形態(tài),貼壁生長時細胞間連接緊密,,呈多邊形或鋪路石狀,。其倍增時間約為 24 - 36 小時,在對數(shù)生長期增殖迅速,。細胞的核型為亞二倍體,,含有 59 - 63 條染色體,,整合的腺病毒 E1 基因破壞了 p53 和 Rb 蛋白的抑癌功能,使得細胞獲得無限增殖能力,。同時,,該細胞系具備高效的外源基因表達系統(tǒng),對多種轉染方法(如脂質體轉染,、電穿孔轉染)均有較高的耐受和響應能力,,轉染效率常超 70% ,這為其在基因表達和蛋白生產(chǎn)方面的應用奠定了基礎,。
在細胞培養(yǎng)方面,,維持低代次是保證細胞性能的關鍵,。常用高糖 DMEM 或 MEM 培養(yǎng)基,,添加 10% 胎牛血清和 1% 雙抗以提供營養(yǎng)并防止污染,培養(yǎng)環(huán)境需嚴格控制在 37℃,、5% CO?的恒溫培養(yǎng)箱中,。傳代時,使用 0.25% 胰dan白酶 - EDTA 消化細胞,,當細胞變圓后及時終止消化,,按 1:3 - 1:5 的比例傳代。為確保細胞的低代次狀態(tài),,需建立詳細的傳代記錄,,并定期進行支原體檢測,防止污染影響細胞特性,。
293 Cells, low passage 的應用場景極為廣泛,。在重組蛋白與疫苗生產(chǎn)領域,它是生產(chǎn)治療性抗體,、細胞因子以及病毒樣顆粒疫苗的理想宿主,,能夠實現(xiàn)大規(guī)模懸浮培養(yǎng),高效分泌具有正確翻譯后修飾的蛋白產(chǎn)物,。在基因治療中,,該細胞系是慢病毒、腺病毒,、腺相關病毒(AAV)等載體的標準包裝細胞,,可制備高滴度病毒液,用于 CAR - T 細胞治療和遺傳病基因治療藥物的研發(fā),。此外,,在藥物研發(fā)與毒性測試、基礎生物學研究等方面,,它也發(fā)揮著重要作用,,可構建疾病模型篩選候選藥物,,或用于探究信號通路和病毒入侵機制等。
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