LS 174T人結(jié)直腸腺癌細胞系
LS 174T人結(jié)直腸腺癌細胞系源自男性結(jié)腸腺癌患者的腫瘤組織，于 20 世紀 70 年代初被成功建立,。在顯微鏡下觀察,，其細胞呈現(xiàn)典型的上皮樣形態(tài)，細胞相互連接,，形成緊密的單層或簇狀結(jié)構(gòu),，細胞大小和形態(tài)存在一定差異，這種異質(zhì)性與人體結(jié)直腸腺癌腫瘤組織的細胞特征高度相似,。其核型為超二倍體,，存在多個染色體畸變，同時攜帶多種關(guān)鍵基因突變,，例如 KRAS 基因突變,、p53 通路相關(guān)基因缺失等，這些遺傳特征不僅賦予細胞惡性增殖的能力,，也為腫瘤研究提供了豐富的靶點,。
HCT - 15 細胞的培養(yǎng)需特定且精細的條件。常用 RPMI - 1640 培養(yǎng)基,，添加 10% 優(yōu)質(zhì)胎牛血清和 1% 雙抗,，以滿足細胞生長所需營養(yǎng)，維持無菌環(huán)境,。其中,，胎牛血清富含細胞生長必需的生長因子、激素,、結(jié)合蛋白等物質(zhì),，能有效促進細胞貼壁和增殖；雙抗則防止細菌和真菌污染,，保障細胞健康生長,。培養(yǎng)環(huán)境為 37℃、5% 二氧化碳與 95% 空氣的混合氣體,，濕度保持在 70% - 80%,。37℃模擬人體體溫，5% 二氧化碳可維持培養(yǎng)基的 pH 穩(wěn)定,，適宜的濕度避免培養(yǎng)基過快蒸發(fā),。
細胞貼壁生長,，當匯合度達 80% - 90% 時需傳代。傳代使用 0.25％（w/v）胰dan白酶 - 0.53mM EDTA 消化,，由于細胞貼壁較緊,，消化時間相對較長，約 1 - 2 分鐘,。在消化過程中,，需在顯微鏡下密切觀察細胞形態(tài)變化，當細胞變圓,、間隙增大時,，及時終止消化，避免過度消化損傷細胞,。若出現(xiàn)消化困難的情況,，可適當提高胰dan白酶濃度或延長消化時間，但需格外注意觀察,。消化后,，需迅速加入含血清的培養(yǎng)基中和胰dan白酶活性，防止殘留胰dan白酶繼續(xù)作用,。傳代比例一般為 1:2 - 1:4 ,，傳代后需定期更換培養(yǎng)基，保證細胞有充足的營養(yǎng)供應(yīng),。凍存時,，凍存液采用 90% 胎牛血清加 10% 二甲基亞砜，按 4℃ 10 分鐘,、-20℃ 2 小時,、-80℃過夜后轉(zhuǎn)至液氮的程序保存,，每一步降溫都能減少細胞內(nèi)冰晶形成,，保護細胞活性。值得注意的是,，復(fù)蘇細胞時,，需將凍存管迅速放入 37℃水浴中快速解凍，以減少低溫對細胞的損傷,。若復(fù)蘇后細胞活力不佳,，可嘗試降低傳代密度，給予細胞更寬松的生長環(huán)境,。
在科學(xué)研究中,，HCT - 15 細胞系應(yīng)用廣泛。利用該細胞系構(gòu)建的耐藥模型,，如 HCT - 15/5FU 細胞系,，是研究氟尿*啶耐藥機制的重要工具,。研究發(fā)現(xiàn)，HCT - 15/5FU 細胞的耐藥涉及胸苷酸合成酶上調(diào),、二氫嘧啶脫氫酶活性增強,、藥物外排與解毒系統(tǒng)激活等多個方面。通過對 HCT - 15 細胞的研究,，不僅能深入探索腫瘤發(fā)生發(fā)展機制,，還能進行抗癌藥物篩選、評估藥物療效,。例如,，在前沿研究中，科研團隊將新型免疫檢查點抑制劑與傳統(tǒng)hua療藥物聯(lián)合作用于 HCT - 15 細胞,，觀察到兩者協(xié)同作用顯著增強了對癌細胞的殺傷效果,，為結(jié)直腸癌的免疫 - hua療聯(lián)合治療策略提供了理論依據(jù)。還有研究團隊運用 HCT - 15 細胞測試新型納米靶向藥物,，該藥物能夠精準識別并作用于癌細胞表面的特定受體,，相比傳統(tǒng)藥物，其對 HCT - 15 細胞的抑制效果更好且副作用更小,。此外,，通過基因編輯技術(shù)對 HCT - 15 細胞的特定基因進行敲除或過表達，可探究基因在腫瘤發(fā)展中的功能,，從而發(fā)現(xiàn)新的治療靶點,，為結(jié)直腸癌的臨床治療提供更多潛在方向。
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