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光度計(jì)物理學(xué)的UV法實(shí)現(xiàn)
選擇Warburg 公式,光度計(jì)可以直接顯示出樣品的濃度,,或者是選擇相應(yīng)的換算方法,,將吸光值轉(zhuǎn)換為樣品濃度。蛋白質(zhì)測(cè)定過(guò)程非常簡(jiǎn)單,,先測(cè)試空白液,,然后直接測(cè)試蛋白質(zhì)。由于緩沖液中存在一些雜質(zhì),,一般要消除320nm 的“背景”信息,,設(shè)定此功能“開”。
漂移的原因是因?yàn)閃arburg 公式吸光值換算成濃度,,乘以一定的系數(shù),,只要吸光值有少許改變,濃度就會(huì)被放大,,從而顯得結(jié)果很不穩(wěn)定,。蛋白質(zhì)直接定量方法,適合測(cè)試較純凈,、成分相對(duì)單一的蛋白質(zhì),。對(duì)于紫外線來(lái)說(shuō)可以之間定量法相對(duì)于比色法來(lái)說(shuō)速度會(huì)更加快,操作也較為簡(jiǎn)便,,可以更加容易受到平行物質(zhì)的干擾,,例如DNA的干擾就是其中之一,此外敏感度也是一方面因素,,要求上來(lái)說(shuō)蛋白的濃度會(huì)高一些,,所以光度計(jì)的UV法是一種光度計(jì)中*的一個(gè)物理學(xué)技術(shù)。