紫外分光光度計(jì)原理是分子的紫外可見吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見輻射光后,,發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜,。它是帶狀光譜,反映了分子中某些基團(tuán)的信息,,可用標(biāo)準(zhǔn)光譜圖再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析,。根據(jù)Lambert-Beer定律:A=εbc(A為吸光度,ε為摩爾吸光系數(shù),,為液池厚度,,c為溶液濃度)可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。
紫外分光光度計(jì)所用比色皿的分類:
比色皿的制造工藝有兩種:一種是粘合劑粘合而成,;另一種是高溫熔融而成,。
比色皿的材料通常來源于石英、熔凝硅石和光學(xué)玻璃,。
常用比色皿的形狀有方形,、矩形和圓筒形,容量一般為幾毫升,。也有用于少量試樣的微型或超微型毛細(xì)管皿。另外還有高,、低溫恒溫比色皿,。
比色皿按照使用的波長范圍分:可見光系列(稱玻璃比色皿);紫外可見光系列(稱石英比色皿),;紅外光系列(稱紅外石英比色皿),。
紫外分光光度計(jì)所用比色皿的選用:
紫外光度實(shí)驗(yàn)中的比色皿通常使用玻璃比色皿和石英比色皿,玻璃比色皿是用光學(xué)玻璃制成的比色皿,,只能用于可見光區(qū),,適用于330-1000nm波長范圍,石英比色皿是用熔融石英(氧化硅)制成的比色皿,,既適用于紫外光區(qū),,也可用于可見光區(qū),,適用于200-400nm波長范圍。
利用石英和玻璃比色皿在紫外光區(qū)和可見光區(qū)有無吸收的差異,,在紫外光區(qū)時(shí),,由于玻璃比色皿強(qiáng)烈吸收紫外光,對(duì)實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)和結(jié)果有影響,,石英比色皿不吸收紫外光,,不會(huì)影響數(shù)據(jù),因此在紫外光區(qū)不使用玻璃比色皿而使用石英比色皿,。而在可見光區(qū),,玻璃的影響非常小,可忽略,,和石英比色皿一樣均可以使用,,但考慮到節(jié)約經(jīng)濟(jì)的因素,由于玻璃比色皿的價(jià)格遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于石英比色皿,,通常選擇可見光區(qū)使用玻璃比色皿,,紫外光區(qū)使用石英比色皿。