固相萃取儀的使用：1.活化
固相萃取儀萃取前先用充滿小柱的溶劑沖洗小柱或用5-10ml溶劑沖洗濾膜使SPE填料保持濕潤,，因為填料干燥會降低樣品保留值，而各小柱的干燥程度不一，也會影響回收率的重現(xiàn)性,。先用甲醇等水溶性有機(jī)溶劑沖洗填料,，因為甲醇能潤濕吸附劑表面，并滲透到非極性的硅膠鍵合相中,，使硅膠更容易被水潤濕,；然后再加入水或緩沖液沖洗，創(chuàng)造和樣品溶劑相容的環(huán)境并提高回收率,。
2.上樣
①用0.1mol/L酸或堿調(diào)節(jié),，使pH=9，離心取上層液萃??；
②用甲醇、乙腈等沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,，以水或緩沖液稀釋后萃?。?/span>
③用酸或無機(jī)鹽沉淀蛋白質(zhì)后取上清液,，調(diào)節(jié)pH值后萃?。?/span>
④超聲15min后加入水,、緩沖液,，取上清液萃取。流速應(yīng)控制為1ml/min,，流速快不利于待測物與固定相結(jié)合,。
3.淋洗
反相SPE的清洗溶劑多為水或緩沖液，可在清洗液中加入少量有機(jī)溶劑,、無機(jī)鹽或調(diào)節(jié)pH值,。加入小柱的清洗液應(yīng)不超過一個小柱的容積，而SPE濾膜為5-10ml,。
4.洗脫
應(yīng)選用5-10ml離子強(qiáng)度較弱但能洗下待測物的洗脫溶劑,。若需較高靈敏度，則可先將洗脫液揮干后,，再用流動相重組殘留物后進(jìn)樣,。體內(nèi)樣品洗脫后多含有水，可選用冷凍干燥法,。保留能力較弱的SPE填料可用小體積,、較弱的洗脫液洗下待測物，再用極性較強(qiáng)的HPLC分析柱如C18柱分析洗脫物,。
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