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小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A ELISA試劑盒

48T--------1000

96T--------1800

小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶2/明膠酶A ELISA試劑盒

檢測原理

試劑盒采用雙抗體一步夾心法酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)（ELISA）,。往

預(yù)先包被血管生成素2(ANG-2)抗體的包被微孔中，依次加入標(biāo)本,、

標(biāo)準(zhǔn)品、HRP標(biāo)記的檢測抗體,，經(jīng)過溫育并*洗滌,。用底物TMB顯

色，TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍(lán)色,，并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成

終的黃色,。顏色的深淺和樣品中的血管生成素2(ANG-2)呈正相關(guān),。

用酶標(biāo)儀在450nm 波長下測定吸光度（OD 值），計(jì)算樣品濃度,。

樣品收集,、處理及保存方法

血清：使用不含熱原和內(nèi)毒素的試管，操作過程中避免任何細(xì)

胞刺激,，收集血液后,，3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘將血清和紅細(xì)胞迅速小心

地分離。

2. 血漿：EDTA,、檸檬酸鹽或肝素抗凝,。3000 轉(zhuǎn)離心 30 分鐘取上清。

3. 細(xì)胞上清液：3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘去除顆粒和聚合物,。

4. 組織勻漿：將組織加入適量生理鹽水搗碎,。3000 轉(zhuǎn)離心 10 分鐘

取上清。

保存：如果樣本收集后不及時(shí)檢測,，請(qǐng)按一次用量分裝,，凍存

于-20℃，避免反復(fù)凍融,，在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍,。

自備物品

1. 酶標(biāo)儀（450nm）

2. 高精度加樣器及槍頭：0.5-10uL、2-20uL,、20-200uL,、200-1000uL

3. 37℃恒溫箱

操作注意事項(xiàng)

1. 試劑盒保存在 2-8℃，使用前室溫平衡 20 分鐘,。從冰箱取出的

濃縮洗滌液會(huì)有結(jié)晶,，這屬于正常現(xiàn)象,，水浴加熱使結(jié)晶*溶解

后再使用,。

2. 實(shí)驗(yàn)中不用的板條應(yīng)立即放回自封袋中，密封（低溫干燥）保

存,。

3. 濃度為 0 的 S0 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品即可視為陰性對(duì)照或者空白,；按照說明

書操作時(shí)樣本已經(jīng)稀釋 5 倍，終結(jié)果乘以 5 才是樣本實(shí)際濃度,。

4. 嚴(yán)格按照說明書中標(biāo)明的時(shí)間,、加液量及順序進(jìn)行溫育操作。

5. 所有液體組分使用前充分搖勻,。

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