MTT Cell Proliferation Assay Kit MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒 MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒
產(chǎn)品簡介:
MTT比色法是一種檢測細胞存活和生長的方法,。MTT細胞增殖及細胞毒性檢測試劑盒(MTT Cell Proliferation and Cytotoxicity Assay Kit)被廣泛應(yīng)用于細胞增殖和細胞毒性的檢測,。MTT檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色Formazan并沉積在細胞中,而死細胞無此功能,。在特定溶劑存在的情況下,,可以被*溶解。然后通過酶標儀可以測定570nm波長附近的吸光度。細胞增殖越多越快,,則吸光度越高;細胞毒性越大,,則吸光度越低,。
產(chǎn)品組成:
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使用說明:
1.收集對數(shù)期細胞,調(diào)整細胞懸液濃度,,分于96孔板,,每孔180μL,3000-10000個細胞/孔,。
2.置37℃,、5%CO2溫箱培養(yǎng)使細胞貼壁,培養(yǎng)6-24小時,。
3.加入適當濃度的受試化合物,,繼續(xù)培養(yǎng)適當時間。
4.小心吸去上清,,加入90μL新鮮培養(yǎng)液,,再加入10μL MTT溶液,繼續(xù)培養(yǎng)4 h,。
5.然后吸掉上清,,每孔加入110μL Formazan溶解液,置搖床上低速振蕩10 min,,使結(jié)晶物充分溶解,。在酶聯(lián)免疫檢測儀490 nm處測量各孔的吸光值。
6.同時設(shè)置調(diào)零孔(培養(yǎng)基,、MTT,、 Formazan溶解液),對照孔(細胞,、相同濃度的**溶解介質(zhì),、培養(yǎng)液、MTT,、 Formazan溶解液),,每組設(shè)定3復(fù)孔。
注意事項:
1.由于使用96孔板進行檢測,,如果細胞培養(yǎng)時間較長,,一定要注意蒸發(fā)的問題。一方面,,由于96孔板周圍一圈*容易蒸發(fā),,可以采取棄用周圍一圈的辦法,改加PBS,水或培養(yǎng)液,;另一方面,,可以把96孔板置于靠近培養(yǎng)箱內(nèi)水源的地方,以緩解蒸發(fā),。
2.MTT溶液為黃色需避光保存,,長時間光照會導(dǎo)致失效。當顏色變?yōu)榛揖G色時,,請勿使用,。Formazan溶解液結(jié)凍或產(chǎn)生沉淀時可以37℃水浴孵育以促進溶解,并且必須在全部溶解并混勻后使用,。
為了您的安全和健康,,請穿實驗服并戴一次性手套操作。
有效期: 12個月有效,。
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