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當前位置:上海復申生物科技有限公司>>技術(shù)文章>>血清熱滅活對細胞的影響
Pinyopummintr等證明血清去除滅活步驟不影響牛胚胎的發(fā)育分化,;有研究結(jié)果證實熱滅活步驟減弱了胎牛血清和小牛血清對細胞的促粘附作用,在用SV-BHK,、BALB-3T3,、CV-1、FS-4細胞對細胞粘附實驗中,,熱滅活對胎牛血清的影響小于對小牛血清的影響,。
我們調(diào)查了熱滅活對胎牛血清以及對其中不同細胞株生長能力的影響。通過比較11個不同細胞株,,發(fā)現(xiàn)其中熱滅活對6個細胞株(HBAE,,MDBK,Vero,,成纖維細胞,,MRC-5)的生長帶來負面影響,三個細胞株(FOX-NY,,MDCK和CHO-K1)不受熱滅活的影響,,而只有兩個細胞株(Balb/3T3,Sp2/0Ag14 hybrid),,在熱滅活之后,,細胞生長有輕微的改善。所以,,在正常的操作下,,熱滅活通常對細胞的生長沒有明顯的促進作用。在正常操作下,,熱滅活經(jīng)常給血清產(chǎn)品帶來負面的影響,,對血清的加熱經(jīng)常導致血清中沉淀的產(chǎn)生,而導致的沉淀又常常被認為是微生物的污染。注意到這個現(xiàn)象之后,,為了驗證污染的存在,,或者促進沉淀的溶解,許多培養(yǎng)者往往將血清放置37℃溫育,。這卻往往使情況變得更糟,,血清中的蛋白進一步的析出,為了確信血清未被污染,,進行的鏡檢,,無菌培養(yǎng)試驗,和革蘭氏染色試驗更是浪費了實驗者大量的時間和精力,。
總之,,多數(shù)細胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,,熱滅活并不會改善細胞的生長,,卻降低了支持細胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進的情況下,,其促進的比率也是微不足道的,。另外,血清的熱滅活導致的沉淀常常被認為是微生物的污染,,從而給用戶和供應商都帶來不必要的麻煩,。我們建議,,對于那些對血清進行滅活的用戶,,需要通過試驗來證實其必要性,確定滅活的適當條件,;在滅活過程中,,需要嚴格認真監(jiān)測,并選擇一個可重復的方案進行操作,。
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