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BD biocoat 基質膠和細胞檢測系統(tǒng)

產品貨號：354230  354234  356230  356231  356234  356235  356237       

儲存和運輸：-20℃儲存,，干冰運輸,。

操作指南：

BD采用技術，從富含胞外基質蛋白的EHS小鼠腫瘤中分離出BD Matrigel 基底膜基質,，其主要成分由層粘連蛋白,，IV型膠原，巢蛋白,，硫酸肝素糖蛋白等組成,，還包含生長因子和基質金屬蛋白酶等。BD Matrigel 基底膜基質在室溫條件下,，聚合形成具有生物學活性的三維基質,，模擬體內細胞基底膜的結構,、組成,、物理特性和功能，有利于體外細胞的培養(yǎng)和分化,，以及對細胞形態(tài),、生化功能,、遷移、侵染和基因表達的研究,。

BD Matrigel 基底膜基質形成的三維培養(yǎng)機制,，可促進上皮細胞、肝細胞,、Sertoli細胞,、黑色素瘤細胞、血管內皮細胞,、甲狀腺細胞及毛囊細胞等的貼壁與分化,。同時，Matrigel 還能影響乳腺上皮細胞的蛋白表達,，支持外周神經的新生和牛輸卵管上皮細胞的分化,，高濃度的Matrigel 適用于研究體內血管生成和腫瘤細胞遷移及腫瘤模型的建立等。

Matrigel 基質會有色差變化（淡黃色到深紅色）,，是由于酚紅和碳酸氫鹽與CO2作用引起的,。但是與5%CO2平衡后色差即會減少。凍融后,，輕輕搖晃試劑瓶使Matrigel分散均勻,。所有操作均需在無菌環(huán)境中進行。試劑瓶瓶蓋可用70%乙醇擦拭,，并自然干燥,。應使用預冷的移液器以保證Matrigel呈勻漿狀。細胞可在0.5mm厚度的Matrigel基質層表面生長,，也可在1mm厚度的Matrigel三維基質內生長,。過度稀釋的Matrigel會形成非膠質的蛋白層，也可以用于細胞貼壁,，但不能用于細胞的分化研究,。

注意：

1.可將凍融后的Matrigel分裝在多個小管，所有分裝均需用預冷的凍存管,，迅速冷凍并保存,，避免多次凍融。

2.Matrigel在22-35℃溫度環(huán)境下快速成膠,，因此溶解時在4℃冰上overnigh凍融（4℃時會隨著溫度的上升部分成膠）,。所有用品在使用前需置于冰浴，必須使用預冷的移液管,、吸頭及小管操作Matrigel,。成膠后的Matrigel可以在4℃24-48小時后重新呈液態(tài)。

推薦包被與成膠方法：

注意：為了保證Matrigel基質膜的成膠性能與穩(wěn)定性,，稀釋濃度不應低于1:3,，可用無血清培養(yǎng)基稀釋,，Matrigel成膠后立即使用。

薄膠成膠方法：

凍融后,，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀,。

將需要使用的培養(yǎng)板置于冰上，加入濃度為50ul/cm2生長面積的Matrigel基質,。

在37℃放置30分鐘,，即可使用。

厚膠成膠方法：

凍融后,，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀,。將需要使用的培養(yǎng)板置于冰浴，將培養(yǎng)的細胞與Matrigel基質混合,，用移液槍頭使其懸浮于基質中,。加入濃度為150-200ul/cm2生長面積的Matrigel基質。在37℃放置30分鐘,，可成膠,。可以加入細胞培養(yǎng)的基質,，可以是細胞直接生長在膠表面,。

薄層包被方法：

凍融后，用預冷的移液槍頭混勻Matrigel基質成勻漿狀,。根據使用需要,，采用無血清培養(yǎng)基稀釋Matrigel基質，根據實驗需要確定*包被濃度,。將稀釋的Matrigel基質包被于所需的培養(yǎng)器皿中,，包被量至少覆蓋整個器皿的生長表面。室溫下孵育1小時,。去除未結合的Matrigel,，用無血清培養(yǎng)基輕輕地沖洗。用BD細胞回收劑（354253）或離散酶（354235）可降解Matrigel基質,，冰浴7小時候回收得到細胞,。